CDK抑制劑（LEE011 hydrochloride）

CDK抑制劑（LEE011 hydrochloride）公司*的產(chǎn)品：ER- Alpha/FITC 熒光標(biāo)記雌激受體α抗體IgG2,3-二氧-5--1, 97%
ER-alpha/FITC 熒光標(biāo)記雌激受體抗體IgG1,2-二溴烷（EDB） 99%
ER- Alpha/FITC 熒光標(biāo)記雌激受體α抗體IgG1,2-二溴烷標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L,溶劑:
ER- Alpha(phospho

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CDK抑制劑（LEE011 hydrochloride）

英文名稱：LEE011 hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

釀酒酵母小鼠嗜粒趨化因子Anti-NMU Antibody人15脂加氧(15-LO/LOX)

多粘芽孢桿菌大鼠血管性血友病因子裂解蛋白Anti-NMS Antibody人15脂加氧(15-LO/LOX)

側(cè)耳人白介1Anti-NMUR1 Antibody人膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)

匍枝根霉(黑根霉)大鼠血管生成4Anti-NOC2L Antibody人膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)

多毛孢菌小鼠嗜粒趨化蛋白Anti-NOC3L Antibody人白三烯C4(LTC4)

香榧嗜藍(lán)孢孔菌人白介17Anti-NOD2 Antibody人白三烯C4(LTC4)

杉葉散斑殼大鼠脂多糖結(jié)合蛋白Anti-NOL8 Antibody人色C(Cyt-C)

沃克曼枸櫞桿菌小鼠E選擇Anti-NOL10 Antibody人色C(Cyt-C)

單增李斯特菌*小鼠凋亡相關(guān)因子Anti-NOM1 Antibody人脂蛋白脂(LPL)

綠色木霉=木木霉大鼠乙脫氫Anti-NOS3 Antibody人脂蛋白脂(LPL)

枯草芽孢桿菌人白介1β (IL-1B)Anti-NOS2 Antibody人糖原磷化同工II(GP-II)

漢遜德巴酵母睪Anti-NOS3 Antibody人糖原磷化同工II(GP-II)

蜻蜓蟲草雌二Anti-NOP56 Antibody人糖原磷化同工MM(GP-MM)

松口蘑（可訂購(gòu)）游離狀腺原T3Anti-NOTCH1 Antibody人糖原磷化同工MM(GP-MM)

Bacillus methylotrophicus大鼠乙脫氫Anti-NOTCH1 Antibody人糖原磷化同工BB(GP-BB)

猴頭小鼠Slit2Anti-NOTCH2 Antibody人糖原磷化同工BB(GP-BB)

環(huán)指蛋白210抗體土黃牛肝菌熒光轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞

RFESD蛋白抗體青枯假單孢桿菌綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞

胰島細(xì)胞再生因子β抗體#大豆慢生根瘤菌人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株

RFTN2蛋白抗體#陰溝腸桿菌人侵襲性脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞
CDK抑制劑（LEE011 hydrochloride）黃白側(cè)耳（姬菇） 法尼

根瘤屬(可訂 3，5-二甲基-3-己

假單胞屬 十五

長(zhǎng)枝木霉 肉桂

澳型核果褐腐病 二苯

短芽孢桿 4-羥基吡啶

米曲霉 4,4'-聯(lián)吡啶

彩色豆馬勃 2,2'-聯(lián)吡啶

嗜鹽鹽漬微 硝苯吡啶

玫瑰單胞屬 吡啶鹽酸鹽

巨大芽孢桿 4-乙酮

Brenneria salicis 1-甲基-2-吡咯烷酮

土曲霉原變種 4-甲氧基苯乙酮

晶粒鬼傘 α-紫羅酮

鹽沼鹽古桿（鹽沼沙雷氏） 環(huán)辛酮 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)