公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PKM2抑制劑(PKM2-IN-1)
英文名稱:PKM2-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PKM2-IN-1是一種酮酸激酶M2(PKM2)抑制劑,其IC50值為2.95μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:94164-88-2 純度:98.35% 分子量:345.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒 ,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit 96T/48T
犬前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒 Canine prostate specific aigen,PSA ELISA Kit
英文名稱HumanOncostatinM,OSMELISAKIT人抑瘤素M(OSM)規(guī)格:96T/48T
純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pcDNA-AM)10微克
RatHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit
魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測試劑盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit
英文名稱MouseCCL22ELISAKit小鼠CCL22規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒50次
RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬角化細胞生長因子(KGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 人膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒
PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-SYN(HumanAlpha-Synuclein)ELISAKit人α突觸核蛋白規(guī)格:48T/96T
血液肌酐(CREATININE)化學比色法定量檢測試劑盒20次
PlaVitaminA,VAELISAKit植物維A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PKM2抑制劑(PKM2-IN-1)phospho-Smad3 (Ser204) 英文名稱: 磷酸化細胞信號轉(zhuǎn)導分子SMAD3抗體 0.1ml
Fascin-3 英文名稱: 肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體 0.1ml
擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體 Anti-Metal ion transporter 0.2ml
Anti-RRAD/FITC 熒光素標記RRAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
SP (Substance P) P物質(zhì)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg