HCV replication抑制劑（R-1479）

HCV replication抑制劑（R-1479）公司*的產品：Anti-Phospho-HSL (Ser660)/FITC 熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PIBF/FITC 熒光素標記孕激素誘導阻斷因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibod

產品屬性：

中文名稱：HCV replication抑制劑（R-1479）

英文名稱：R-1479

產品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

金松雙黃(標準品)英文名稱： Benzyl acetateG蛋白偶聯(lián)受體18抗體包裝5g

金鐵鎖（標準品）英文名稱：  Bensulfuron-methylG蛋白偶聯(lián)受體65抗體包裝100ml

金銀花（標準品）英文名稱： Benazolin-ethyl ester生長終止特異性同源盒基因抗體包裝500ml

金櫻根（標準品）英文名稱： 3,4-Benzopyrene谷受體2抗體包裝100g

金櫻子（標準品）英文名稱：  (±)-1,3-Butanediol谷受體3抗體包裝25g

金盞銀盤（標準品）英文名稱： Butachlor solution谷受體4抗體包裝500g

筋骨草甾C英文名稱： Butachlor促代謝型谷受體1抗體包裝1g

錦燈籠（標準品）英文名稱： Butachlor solution甘受體α4抗體包裝250mg

京大戟（標準品）英文名稱： Butachlor solution生長分化因子8抗體包裝50mg

京尼平(標準品)英文名稱： Buturon磷化糖原合激-3β抗體包裝1g

京尼平甙(標準品)英文名稱： Bromopropylate solutionGlu-Glu tag抗體包裝25g

京尼平苷(標準品)英文名稱： Bromopropylate solution胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g

荊芥（標準品）英文名稱： Bronopol甘受體alpha 1/2/3型抗體包裝250mg

荊芥穗（標準品）英文名稱： Benfluralin抑制型G蛋白α3抗體包裝25g

九里香（標準品）英文名稱： Benzo(k)fluoranthene促性腺激釋放激受體抗體包裝5g

腐皮鐮孢Fusarium│solani 質量規(guī)格：>98%,培養(yǎng)級趨化因子配體17試劑盒牛磺鵝去氧膽 ;Taurochenod

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格：>98%,BR趨化因子26試劑盒牛血清白蛋白;Bovine albumi

貝倫格葡萄座腔菌梨生?；?/span>Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品趨化因子2試劑盒耐斯糖;Nystose
HCV replication抑制劑（R-1479） 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)