商品介紹:
RET Kinase inhibitor1是RET激酶抑制劑。參考文獻WO2014141187A1中的化合物27。IC50值<100nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1627856-64-7 純度:99.78% 分子量:467.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RET激酶抑制劑(RET Kinase inhibitor 1)
英文名稱:RET Kinase inhibitor 1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
瘡皰桿菌Bullera sinensis
香菇屬Pseudozyma sp.
短小芽孢桿菌Bullera sp.
食芽孢桿菌Pseudozyma aphidis
小單孢菌Bullera sinensis
釀酒酵母Pseudozyma antarctica
紅酵母屬Candida sp.
蠟樣芽孢桿菌Pseudozyma antarctica
綠色木霉Bullera kunmingensis
馬鏈球菌Bulleromyces albus
費氏中華根瘤菌Bullera sinensis
植物乳桿菌Bulleromyces albus
糙皮側耳Bullera sinensis
清酒假絲酵母Candida parapsilosis
鱗貝云芝Bullera variabilis
枯草芽孢桿菌Cryptococcus victoriae
小鼠白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM) 三七皂苷R2(R型)
小鼠白介11(IL-11)免疫試劑盒Bax抗體人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM) 三七皂苷R2(S型)
小鼠白介10(IL-10)免疫試劑盒Bcl-2抗體人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb) 三七總皂苷
小鼠白喉IgG抗體免疫試劑盒腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb) 三十烷
RET激酶抑制劑(RET Kinase inhibitor 1)SEMA4B 英文名稱: 跨膜蛋白SEMA4B抗體 0.2ml
E2F1 英文名稱: 轉錄因子E2F-1抗體 0.1ml
碳酸酐酶2抗體 Anti-CA Ⅱ 0.1ml
Anti-TNK1/FITC 熒光素標記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格 0.1ml
CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg