商品介紹:
VT-464是CYP17裂解酶抑制劑,對h-Lyase的IC50為69nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1610537-15-9 別名:Seviteronel 純度:98.98% 分子量:399.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CYP17裂解酶抑制劑(VT-464)
英文名稱:VT-464
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌人型肝炎IgMAnti-TNFRSF6B Antibody人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)
變幻青霉大鼠游離狀腺原Anti-TNFRSF9 Antibody人降解加速因子(DAF)
庫德里阿茲威畢赤酵母人型肝炎IgGAnti-TNFSF10 Antibody人降解加速因子(DAF)
大腸埃希菌大鼠新生甲狀腺Anti-TNFSF11 Antibody人T活化連接蛋白(LAT)
香菇大鼠胰島Anti-TNFSF4 Antibody人T活化連接蛋白(LAT)
干草鞘單胞菌人糖蛋白130Anti-TNFSF12 Antibody人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)
球黑孢菌人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子Anti-TNFSF8 Antibody人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)
異常畢赤酵母大鼠C肽Anti-TNKS1BP1 Antibody人B連接蛋白(BLNK)
蠟樣芽孢桿菌人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓Anti-TNIP2 Antibody人B連接蛋白(BLNK)
釀酒酵母大鼠絨毛膜促性腺激Anti-TNFSF9 Antibody人尿相關蛋白C(UreC)
水稻紋枯?。⒖萁z核菌)人蕈堿型乙酰受體亞型M3Anti-TNNI3K Antibody人尿相關蛋白C(UreC)
黑曲霉大鼠促黃體激Anti-TOMM20 Antibody人銜接蛋白活化因子1(APAF1)
阪崎氏年輕泰坦桿菌(阪崎克羅諾桿菌) 大鼠抗心肌抗體Anti-TOB1 Antibody人銜接蛋白活化因子1(APAF1)
亮白曲霉人睪受體Anti-TNNI3 Antibody人錨蛋白B(Ank-B)
戊糖乳桿菌大鼠抗中性粒/中心體抗體Anti-TNS3 Antibody人錨蛋白B(Ank-B)
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌人蕈堿型乙酰受體Anti-TOMM20 Antibody人潛伏膜蛋白1(LMP-1)
紡錘體和著絲粒相關蛋白1抗體蘇云金芽孢桿菌抗青霉單克抗體7株
TH糖蛋白抗體蘇云金芽孢桿達可他亞種抗黃曲霉毒B1小鼠7
輔C還原核心蛋白1抗體核桃黃極毛桿菌抗人IgG小鼠7
泛結(jié)合E2變異體1抗體香菇?南陽8號抗補體C3小鼠7
CYP17裂解酶抑制劑(VT-464)納瓦河部落奇異球 去氧紫草
長雙歧桿 20-去氧巨大戟萜
大腸桿 7-羥基千金子二萜
木霉 芹糖異甘草苷
pGro7 芹菜-7-0-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷
木賊鐮孢 5-羥色鹽酸鹽
嗜松青霉 七葉樹皂苷B
點柄乳牛肝 8-去乙酰基滇烏堿
泛養(yǎng)副球 羥基吳茱萸堿
枯草芽孢桿 去甲檳榔次堿
平菇 青蒿乙
葫蘆細基格孢 3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮
Sphingomonas 25-羥基原人參二
冷海水黃桿 1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮
柯奈尼亞小單孢 去甲基川陳皮