商品介紹:
CHMFL-BMX-078是高效的,選擇性的,不可逆的,類型IIBMX激酶抑制劑,IC50值為11nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1808288-51-8 別名:CHMFL-BMX 078 純度:98.0% 分子量:625.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠棕櫚?;さ鞍?/span>6(MPP6)ELISA試劑盒 ,英文名: MPP6 ELISA Kit
貓p27核心抗原(P27)ELISA檢測(cè)試劑盒Felisp27coreaigen,P27ELISAKit 96T/48T
犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Dog serum amyloid A,SAA ELISA Kit
英文名稱MouseAILR1ELISAKIT小鼠AILR1規(guī)格:96T/48T
腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)瓦辛斯泰雷(WahinStarry)銀染試劑盒50次
RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL2 ELISA Kit
人多巴胺(DA)ELISA檢測(cè)試劑盒humandopamine,DAELISAKIT 96T/48T
大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit
英文名稱Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)規(guī)格:96T/48T
酒類乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitβ-HCG人絨毛膜促性腺激素β規(guī)格:48T/96T
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒
RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody)ELISAKit人抗甲型肝炎病毒IgM抗體規(guī)格:48T/96T
血液D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineHistamine,HISELISAKit豬組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
IIBMX激酶抑制劑(CHMFL-BMX-078)phospho-14-3-3 protein zeta + delta (Ser58) 英文名稱: 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
phospho-E2F1 (Ser337) 英文名稱: 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml
神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體 Anti-P311 protein 0.1ml
Anti-SP /FITC 熒光素標(biāo)記P物質(zhì)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKBIA(Tyr305) 磷酸化IKB alpha抗體 規(guī)格 0.1ml
Cytomegalovirus (CMV)PP65 細(xì)胞巨化病毒(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg