商品介紹:
PF-06282999是一種有效的,選擇性的髓過氧物酶抑制劑,用于治療心血管疾病。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1435467-37-0 純度:99.05% 分子量:325.77 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:髓過氧物酶抑制劑(PF-06282999)
英文名稱:PF-06282999
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g
愛普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pamidronate Disodium干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g
基己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附;α-Cyperone
: =ATCC15173=CCUG407=CIP7715=DSM30026=ICPB4221=IFO15125=JCM5490=LMG1231=NCTC8582=AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異烏藥內(nèi)酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
髓過氧物酶抑制劑(PF-06282999)纖維母生長因子6抗體梨苷 Aflatoxin B2
免疫球蛋白A Fc段受體1抗體梨果(標(biāo)準(zhǔn)品) Aflatoxin G1
脂肪延長抗體梨葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Aflatoxin G2
巖藻糖轉(zhuǎn)移2抗體芒柄花苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Alizarin yellow R , sodium salt
雞白痢、雞傷寒抗體芒柄花;芒柄花黃(標(biāo)準(zhǔn)品) ALL, D-Allose
范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體玫果(標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-D-Glucose-1-phosphate, disodium salt, hydrate
卵泡抑抗體囊(標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-Methylcinnamic acid
Fas活化的絲/蘇激抗體桐 Aluminum acetate, basic
脆性組三聯(lián)體抗體五加(標(biāo)準(zhǔn)品) Aluminum fluoride trihydrate