商品介紹:
Clotrimazole是咪唑衍生物,有抗真菌活性,是P450抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):23593-75-1 純度:99.71% 分子量:344.84 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
野菊花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Tyrosine磷化HER4抗體包裝25g
野馬追(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Histidine糖蛋白β-1B抗體包裝500g
野馬追內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride磷化熱休克蛋白27抗體包裝50mg
野馬追內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Alanine tert-Butyl Ester HydrochlorideHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體包裝1g
野馬追內(nèi)酯K英文名稱(chēng): D-Arginine人瘤病16型E7抗體包裝5g
野牡丹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): ADMAHER2抗體包裝1g
野木瓜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): N'-Nitro-D-arginine 人胎盤(pán)泌乳抗體包裝5g
野漆樹(shù)苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Asparagine monohydrate熱休克蛋白27抗體包裝25g
葉黃; 二羥基-d-胡蘿卜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Aspartic acid 高遷移率族蛋白A1抗體包裝5g
葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester磷化HER2受體抗體包裝1g
葉下珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Glutamic acid熱休克蛋白-20抗體包裝25g
夜香牛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Nα-Tosyl-L-lysine chloromethyl ketone HCl淀粉抗體包裝5g
一點(diǎn)紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Glycyl-L-tyrosineA型流感病H1N1-M2蛋白抗體包裝100g
一葉秋堿 ,一葉萩堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Leucine亨丁頓舞蹈癥相互作用蛋白12抗體包裝25g
一枝黃花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): H-D-Lys-OH·HCl單純皰疹病1型DNA聚合催化亞單位抗體包裝5g
: HBUM171092資源名稱(chēng): 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品硫脂抗體ELISA Kit苦蒿;Blinin
秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR硫氧還蛋白域包含蛋白6試劑盒可可堿;Theobromine
: Ye7231資源名稱(chēng): 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP,BR硫氧還蛋白依賴(lài)性過(guò)氧化物還原,線(xiàn)粒體試劑盒咖啡乙酯;Ethyl caffeate
P450抑制劑(Clotrimazole)異戊烯焦磷異構(gòu)2抗體β-桉葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside
IL-2誘導(dǎo)型T激抗體β-谷甾 Litmus
IGF2因的互補(bǔ)因1蛋白抗體β-胡蘿卜(標(biāo)準(zhǔn)品) 7-O-Methylaloeresin A
干擾誘導(dǎo)蛋白44樣蛋白抗體β-欖香;β-嵐香(標(biāo)準(zhǔn)品) Cistanoside A
整合β4抗體β-萘黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloeresin D
kappa輕鏈可變區(qū)抗體β-石竹烯(標(biāo)準(zhǔn)品) Picfeltarraenin IV
誘導(dǎo)協(xié)同激分子CD278抗體β-香樹(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品) Polygalasaponin XXXI
白介31抗體β-乙酰氧異戊酰阿卡寧 Bismarck Brown R
白介28A抗體γ-丁(GABA),標(biāo)準(zhǔn)品 Bismarck Brown Y