商品介紹:
LDN-192960是一種有效的Haspin(單倍體生殖細(xì)胞特異性核蛋白激酶)抑制劑,其IC50值為0.010μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):184582-62-5 純度:99.56% 分子量:328.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
P450家族成員2E1(CYP2E1)ELISA Kit英文名稱:CYP2E1 ELISA Kit角蛋白3+12抗體包裝5g
P450家族成員2B6(CYP2B6)ELISA Kit英文名稱:CYP2B6 ELISA Kit接頭蛋白CrkL抗體包裝100g
P450家族成員27B1(CYP27B1)ELISA Kit英文名稱:CYP27B1 ELISA Kit色P450 24A1抗體包裝25g
C氧化亞基Ⅲ(COX3)ELISA Kit英文名稱:COX3 ELISA Kit色P450 2R1抗體包裝25g
C(CYCS)ELISA Kit英文名稱:CYCS ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體包裝1g
細(xì)胞間粘附分子5(ICAM5)ELISA Kit英文名稱:ICAM5 ELISA Kit鈣周期結(jié)合蛋白抗體包裝5g
細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)ELISA Kit英文名稱:ICAM2 ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框69抗體包裝100g
細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA Kit英文名稱:ICAM1 ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g
細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA Kit英文名稱:ARC ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框71抗體包裝5g
細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA Kit英文名稱:CDC25 ELISA Kit異染色體同源蛋白1抗體包裝25g
細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)ELISA Kit英文名稱:PDCD1LG1 ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝5g
硒蛋白P1(SEPP1)ELISA Kit英文名稱:SEPP1 ELISA Kit霉抗體包裝1g
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5A(WNT5A)ELISA Kit英文名稱:WNT5A ELISA Kit4號(hào)染色體開放閱讀款包裝250mg
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)ELISA Kit英文名稱:WNT3A ELISA Kit凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體包裝5g
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B(WNT10B)ELISA Kit英文名稱:WNT10B ELISA Kit色B抗體包裝25g
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP組織蛋白K試劑盒戊型肝炎病IgG抗體國(guó)家參考品
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白H試劑盒巨?。–MV)IgM抗體國(guó)家參考品
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,超純組織蛋白G自身抗體試劑盒型肝炎病抗體快速檢測(cè)試劑國(guó)家參考品
Haspin抑制劑(LDN-192960)碳二乙酯Human, Mouse, Rat
碳雙(對(duì))酯Human, Mouse
脫水山梨糖三油酯Human, Mouse, Rat
脫水山梨糖一月桂酯Human, Mouse, Rat
維生A十六酯Human, Mouse, Rat
五棓子酯Human, Mouse
戊二二酯Human, Mouse, Rat
戊酯Human, Mouse, Rat
烯二氧酯Human, Mouse, Rat