多靶點(diǎn)激酶抑制劑（Altiratinib）

多靶點(diǎn)激酶抑制劑（Altiratinib）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-TTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CASPASE3凋亡抑制劑 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
四川散斑殼Serratia rubidaea豬乙型腦炎病抗原

栗疫菌Burkholderia vesicularis豬口蹄疫抗原

檸檬黃紅色桿菌Mycobacterium terrae豬口蹄疫抗原

枯草芽孢桿菌Lactobacillus johnsonii豬瘟病抗原

雪白曲霉Brevundimonas vesicularis豬瘟病抗原

慢生根瘤菌Delftia acidovorans豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)

米根霉Burkholderia gladioli豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)

少根根霉Rhodobacter blasticus豬二氧化(DAO)

辣椒枯萎Rhodobacter capsulatus豬二氧化(DAO)

枯草芽孢桿菌Rhodobacter veldkampii豬膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)

大腸埃希氏菌Rhodospirillum rubrum豬膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)

彎孢菌Geobacillus stearothermophilus豬腸三葉因子(ITF)

微紫青霉Geobacillus stearothermophilus豬腸三葉因子(ITF)

粉紅單端孢Geobacillus stearothermophilus豬活化A(ACV-A)

大豆慢生根瘤菌Geobacillus stearothermophilus豬活化A(ACV-A)

AlbidiferaxGeobacillus stearothermophilus豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)

血清淀粉樣蛋白P成份抗體嗜線蟲致病桿菌紐波特沙門氏菌

eIF4E結(jié)合蛋白2抗體野油菜黃單胞菌(甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌, 野油菜桿菌)蒙得維的亞沙門氏菌

跨膜蛋白Smoothened抗體遲緩芽胞桿菌曼徹斯特沙門氏菌

斯鈣抗體蘇云金桿菌太平洋亞種沙門氏菌第II亞屬
多靶點(diǎn)激酶抑制劑（Altiratinib）壤霉 內(nèi)酯

南擬酵母 橙皮

無花果曲霉 新

鍺栓孔 

釀酒酵母 鹽酸巴馬

黑曲霉 1,5-二咖啡?？鼘幩?/span>

阿爾及亞擬盤多毛孢 1,3-二咖啡酰奎寧酸/洋薊

拜城鏈霉 異綠原酸C

鹽古桿 異綠原酸B

香菇 異綠原酸A

馬德里毛殼 隱綠原酸

麥根腐平臍蠕孢 新綠原酸

德爾布有孢酵母 綠原酸

新城疫病 秦皮乙

尖孢鐮刀 秦皮甲