公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(NS-018 maleate)
英文名稱:NS-018 maleate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NS-018maleate是一個(gè)ATP競(jìng)爭(zhēng)的JAK2小分子抑制劑,在Ba/F3-JAK2V617F細(xì)胞中IC50值是470nM,對(duì)JAK2的選擇性是JAK家族中其它成員的30-50倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1354799-87-3 純度:98.33% 分子量:505.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小鼠自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)ELISA試劑盒 ,英文名: AIRE ELISA Kit
犬C肽(C-Peptide)ELISA檢測(cè)試劑盒 96T/48T
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒 Dog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
英文名稱FN纖維連結(jié)蛋白規(guī)格:96T/48T
腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)亞甲基藍(lán)(METHYLENEBLUE)染色試劑盒50次
Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA試劑盒大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測(cè)試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T
人TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒 Human THP ELISA Kit
英文名稱MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP90)規(guī)格:96T/48T
ITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
rabbitneuroophin3,-3ELISA試劑盒兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬辛型肝炎病毒(TTV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒
RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody)ELISAKit人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規(guī)格:48T/96T
血液L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
JAK2抑制劑(NS-018 maleate)ZBTB3 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB3抗體 0.2ml
DRES17 英文名稱: 癌相關(guān)蛋白DRES17抗體 0.2ml
神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體 Anti-Amph 0.1ml
Anti-YY1/FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg