PI3K/Akt抑制劑(Miltefosine)

PI3K/Akt抑制劑(Miltefosine)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-MLH1/FITC 熒光素標(biāo)記錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Trk B/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCA7 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
菊苣（毛菊苣）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triphenyl phosphateGCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

菊苣英文名稱： Tricosane胰島樣生長(zhǎng)因子1受體相互作用蛋白1抗體包裝5g

菊苣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Undecane鳥苷環(huán)化α1/GCS-α-1抗體包裝1g

橘葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Undecanoic acidG蛋白偶聯(lián)受體125抗體包裝5g

巨大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Adipic acidG蛋白偶聯(lián)受體84抗體包裝5g

具棲冬青苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： AcetamideG蛋白偶聯(lián)受體G2A抗體包裝1g

瞿麥（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱：  p-AnisaldehydeG蛋白偶聯(lián)受體1抗體包裝5g

卷柏(墊狀卷柏)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bis(2-ethylhexyl) sebacateG蛋白偶聯(lián)受體100抗體包裝100mg

卷柏(卷柏)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,4-ButanediolG蛋白偶聯(lián)受體101抗體包裝25mg

決明蒽醌;美決明子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (±)-1,2,4-ButanetriolG蛋白偶聯(lián)受體103抗體包裝25g

決明子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl decanoateG蛋白偶聯(lián)受體110抗體包裝5g

決明子（小決明）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl laurateG蛋白偶聯(lián)受體12抗體包裝1mg

爵床（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl palmitate腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體包裝5mg

咖啡乙酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl salicylateG蛋白偶聯(lián)受體58抗體包裝100g

卡瓦胡椒A英文名稱： Methyl oleateG蛋白偶聯(lián)受體128抗體包裝25g

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品輕鏈鐵蛋白試劑盒檸檬 ;Citric acid

?？曝愄厥暇?/span>Cobetia│marina 質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP,AR試劑盒檸檬烯;Cinene

茄鏈格孢菌Alternaria│solani Sorauer 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2試劑盒女貞苷;ligustroflavone
PI3K/Akt抑制劑(Miltefosine)鹽奧布Human, Mouse, Rat

鹽奧洛他定Human, Mouse

鹽貝那替Human, Mouse, Rat

鹽倍他司汀Human, Mouse

鹽海拉明Human, Mouse

鹽海索Human, Mouse

鹽芐達(dá)明Human, Mouse, Rat

鹽卡巴肼/鹽芐肼Human

鹽卡特羅Human, Mouse