ATPase VCP/p97抑制劑（NMS-859）

ATPase VCP/p97抑制劑（NMS-859）公司*的產(chǎn)品：PARP/FITC 熒光標(biāo)記多腺苷二多聚抗體IgG正釩鈉 99.99% metals basis
Parkin protein/FITC 熒光標(biāo)記帕金蛋白抗體IgG硅油II 色譜固定液，200℃++
Parvalbumin/FITC 熒光標(biāo)記微白蛋白/細(xì)小清蛋白抗體IgG硅油III 色譜固定液
PAX1/FITC 熒光

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：ATPase VCP/p97抑制劑（NMS-859）

英文名稱：NMS-859

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

蕈狀芽孢桿菌人血小板因子4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠皮質(zhì)(Cortisol)

微紫青霉人淋巴功能相關(guān)抗原2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促甲狀腺(TSH)

地絲雙足囊菌人白三烯E4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促甲狀腺(TSH)

釀酒酵母人D二聚體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲基化(Methylase)

異常威克漢姆酵母人免疫球蛋白EBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲基化(Methylase)

地衣芽孢桿菌人髓系觸發(fā)受體-1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)

德沃斯氏菌人白調(diào)節(jié)Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)

毛木耳781人血小板生成Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白脂(LPL)

米根霉人白血病抑制因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白脂(LPL)

金黃色葡萄球菌金黃亞種人Salusin-αBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)

冷桿菌屬人胰島受體底物2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)

釀酒酵母人轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)

果生鏈核盤菌人晚期氧化蛋白產(chǎn)物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)

灰黃青霉人胰島淀粉樣多肽Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工II(GP-II)

金針菇—雜交19人糖化蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工II(GP-II)

多主葡萄殼菌人糖化白蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)

受精卵抑制蛋白1樣蛋白抗體蹄形干酪菌恒河猴肺細(xì)胞

鋅指蛋白ZBT10抗體梓鏈格孢棕果蝠肺成纖維細(xì)胞

鋅指蛋白BED抗體櫻桃鏈格孢棕果蝠皮膚成纖維細(xì)胞

2'-5'-寡腺苷合成3抗體薔薇生鏈格孢家豬皮膚細(xì)胞
ATPase VCP/p97抑制劑（NMS-859）平田頭菇 細(xì)辛脂

異常漢遜酵母 多粘B硫酸鹽

白僵 古倫賓

米根霉 霉鹽酸鹽

金黃色葡萄球 乙氧基白屈菜紅堿

枯草芽胞桿 頭孢唑啉鈉

狀鞘氨單胞 頭孢曲松鈉

帶小棒鏈霉 芫花

草酸青霉 四環(huán)

芽孢桿 鹽酸四環(huán)

潮汐藤黃色單胞 鏈脲佐

南假紅細(xì) 替西林鈉

釀酒酵母 莫能鈉

北京擲孢酵母 3,6′-二芥子?；崽?/span>

芽孢桿屬 血竭高酸鹽