公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RHA與EWS-FLI1結合抑制劑(YK-4-279)
英文名稱:YK-4-279
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
YK4-279是RNA解旋酶A(RHA)與致癌轉(zhuǎn)錄因子EWS-FLI1結合抑制劑,能抑制ESFT細胞增長,誘導凋亡。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1037184-44-3 純度:99.61% 分子量:366.2 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Bacillus acidiceler Peak et al. Pseudomonas oleovorans大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas oryzihabitans大鼠脂蛋白α(Lp-α)
芽胞桿菌Pseudomonas oryzihabitans大鼠脂蛋白α(Lp-α)
短小芽孢桿菌Pseudomonas oryzihabitans大鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)
賴氏毛殼Pseudomonas oryzihabitans大鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)
鹽沼鹽桿菌(可訂)Pseudomonas oryzihabitans大鼠IX(FIX)
紅緣層孔菌Pseudomonas otitidis大鼠IX(FIX)
伊平屋橋大洋芽孢桿菌Pseudomonas oryzihabitans大鼠Ⅹ(FⅩ)
嗜中溫羧用桿菌Pseudomonas ovalis大鼠Ⅹ(FⅩ)
查帕西斯瘤胃球菌Cupriavidus oxalaticus大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)
嗜果刀孢Pseudomonas pavonaceae大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)
藍灰鏈霉菌Pseudomonas pertucinogena大鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)
多噬香鞘單胞菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)
潮濕纖維單胞菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠凝血抗凝血復合物(TAT)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS1/2Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠凝血抗凝血復合物(TAT)
克里布所類諾氏菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠抗凝血受體(ATR)
腺苷單磷活化蛋白激α2抗體黃綠綠僵菌血比色法測試盒
prox-1抗體大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種腎功能 腎功能 腎功能 腎功能 腎功能 腎功能
親環(huán)蛋白親環(huán)PPIA抗體氧化微桿菌尿比色法測試盒 (二乙酰肟法)
多效生長因子抗體熒光威克酵母尿比色法測試盒(脲法)
RHA與EWS-FLI1結合抑制劑(YK-4-279)多主葡萄殼 異
Shimia marina 桑根酮D
黑曲霉 維生B3
類干酪乳桿 α-香附酮
枯草芽孢桿 5-核黃磷酸鈉鹽二水物
居土節(jié)桿 5-核黃磷酸鈉鹽
大黃歐文氏 姜酮
黑曲霉 維生B2
Microvirga sp. 具棲冬青苷
圍小叢殼 斯皮諾
根瘤 維生B1
瘡皰酸桿 乙酸維生E
脂肪桿 甜橙黃酮
Geothermomicrobium 維生E油
檸檬色節(jié)桿 維生E