公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(BMS-911543)
英文名稱:BMS-911543
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BMS-911543是JAK2抑制劑,對依賴于JAK2信號通路的細(xì)胞有抗增殖活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1271022-90-2 純度:98.03% 分子量:432.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
樟疫霉人胰島受體βBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)
熱帶假絲酵母人糖化血紅蛋白A1cBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白α(Lp-α)
Microbacterium pumilum 人胰高血糖樣肽1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白α(Lp-α)
斯氏假單胞菌人甲狀腺激免疫球蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠大內(nèi)皮(Big ET)
淡紫犁頭霉人甲狀旁腺激Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠大內(nèi)皮(Big ET)
釀酒酵母人甲肟前列腺D2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)
糙孢籃狀菌人高敏甲狀腺Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)
葡萄汁酵母人高靈敏度促甲狀腺激Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠Ⅸ(FⅨ)
枯草芽孢桿菌枯草亞種人多巴Bacillus agaradhaerens小鼠Ⅸ(FⅨ)
新疆黃桿菌人Bacillus subtilis var. aterrimus小鼠Ⅹ(FⅩ)
中國蜜環(huán)菌人促腎上腺皮質(zhì)激Bacillus thuringiensis小鼠Ⅹ(FⅩ)
淡色叢赤殼人促腎上皮質(zhì)激釋放激Bacillus thermocloacae小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(vWF)
金華戈登氏人甲狀腺球蛋白Lactobacillus rhamnosus小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(vWF)
反硝化無色桿菌人真核翻譯起始因子3aBacillus subtilis var. aterrimus小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)
釀酒酵母人磷化外信號調(diào)節(jié)激Bacillus subtilis var. aterrimus小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)
綠木霉人受磷蛋白Bacillus thuringiensis小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體致病疫霉獼猴肺細(xì)胞
抑瘤M抗體點枝頂孢洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7
抑瘤M受體抗體茄類鐮刀菌洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A
鳥基甲酰轉(zhuǎn)移抗體長根靜灰球菌中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克)
JAK2抑制劑(BMS-911543)球孢鏈霉黃色變種 伊曲康唑
釀酒酵母 羅紅霉
溫特曲霉 榿木酮
葡萄座腔 款冬酮
大西洋女神 偽原
黑木耳 湖貝甲
褐黑口蘑 鹽酸土霉
醋化醋桿奧爾蘭亞種 白花前胡乙
海綿假單胞 小豆蔻明
芽孢桿 土霉
長枝木霉 喬松
動膠樣申氏 喬松
大豆根瘤(都更名費氏中華根瘤) 決明子
少根根霉 青霉鏈霉新霉溶液
熒光假單胞 瓜子金皂苷己