模擬肽類抑制劑(Danoprevir)

模擬肽類抑制劑(Danoprevir)公司*的產(chǎn)品：Anti-Haase/FITC 熒光素標(biāo)記透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-R-cadherin /FITC 熒光素標(biāo)記R-鈣粘附分子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BBS5 巴德-畢德氏綜合

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：模擬肽類抑制劑(Danoprevir)

英文名稱：Danoprevir

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

卡瓦胡椒B英文名稱： Methyl undecanoateG蛋白偶聯(lián)受體128抗體包裝5g

堪非-3-O-桑布雙糖苷英文名稱： NonaneG蛋白偶聯(lián)受體146抗體包裝25g

柯里拉京（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-NonanolG蛋白偶聯(lián)受體146抗體包裝5g

柯諾辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱：  Nonoic acidG蛋白偶聯(lián)受體17抗體包裝1g

柯伊利-7-O-葡萄糖苷,野決明苷英文名稱： n-OctanolG蛋白偶聯(lián)受體19抗體包裝250mg

科羅索（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： n-Octanoic acidG蛋白偶聯(lián)受體20抗體包裝5g

榼藤子仁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： OctadecaneG蛋白偶聯(lián)受體21抗體包裝1g

可可堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-OctanolG蛋白偶聯(lián)受體22抗體包裝250mg

客西茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： OctacosaneG蛋白偶聯(lián)受體25抗體包裝1g

苦菜子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxalic acid dihydrateG蛋白偶聯(lián)受體26抗體包裝25ml

苦參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,2-PropanediolG蛋白偶聯(lián)受體27抗體包裝25ml

苦參I英文名稱： 1-PhenyldodecaneG蛋白偶聯(lián)受體3抗體包裝100mg

苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-PhenylethanolG蛋白偶聯(lián)受體31抗體包裝25mg

苦參英文名稱： 1,3-PropanediolG蛋白偶聯(lián)受體32抗體包裝100g

苦參新A英文名稱： (?)-α-PineneG蛋白偶聯(lián)受體34抗體包裝25g

類諾卡氏菌Nocardioides│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,可用于培養(yǎng)親環(huán)蛋白A試劑盒擬人參皂苷RT5;Pseudoginse

鼠李糖乳桿菌Lactobacillus│rhamnosus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1試劑盒擬人參皂苷F11;Pseudoginse

: No714資源名稱: 宋內(nèi)氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%鞘脂激活蛋白原試劑盒?；?Taurine
模擬肽類抑制劑(Danoprevir)鹽川芎(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

鹽番茄（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

鹽黃柏(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

鹽黃連（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

鹽毛果蕓香(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

鹽青藤（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

鹽去氫駱駝蓬（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

鹽石蒜(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

鹽甜菜（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat