詳細介紹
商品介紹:
JW55是一種有效的選擇性β-catenin抑制劑,通過抑制端錨聚合酶(tankyrase1和tankyrase2,TNKS1/2)發(fā)揮作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:664993-53-7 純度:99.16% 分子量:434.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:β-catenin抑制劑(JW 55)
英文名稱:JW 55
產品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
海床游動微菌Mycobacterium abscessus豬主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)
黑葡萄穗霉Klebsiella oxytoca豬β干擾(IFN-β/IFNB)
聚生殼菌Arthrobacter nicotianae豬β干擾(IFN-β/IFNB)
大腸埃希氏菌Arthrobacter nicotianae豬食欲受體(OXR)
普通紅色桿菌Brevundimonas subribrioides豬食欲受體(OXR)
喜土毛束霉Burkholderia cepacia豬食欲/阿立新B(OX-B)
芽植單胞菌屬Lactobacillus amylophilus豬食欲/阿立新B(OX-B)
地羅河桿菌Lactobacillus amylovorus豬白介1α(IL-1α)
香菇Lactobacillus gasseri豬白介1α(IL-1α)
化妝品 二惡烷Lactobacillus johnsonii豬促胃液受體(GsaR)
粉紅單端孢Lactobacillus parakefiri豬促胃液受體(GsaR)
蘇云金芽胞桿菌加拿大亞種Geobacillus stearothermophilus豬生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)
三側毛殼Halobacillus halophilus豬生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)
雞傷寒沙門氏菌Halobacillus trueperi豬(Dex)
谷棒桿菌Xanthomonas campestris豬(Dex)
圓弧青霉Halobacillus litoralis豬D二聚體(D2D)
4羥基壬烯抗體根瘤菌(紅豆草)沙門氏菌第IIIb亞屬
精神障礙相關GAP蛋白抗體根瘤菌(小冠花)渥興頓沙門氏菌
神經生長相關蛋白SCG10抗體產油油脂酵母甲型副傷寒沙門氏菌無動力變種
S100A4抗體布魯塞爾德克酵母德比沙門氏菌
β-catenin抑制劑(JW 55)耐鹽糖霉 秦皮
灰產色鏈霉 黃芩
Flavobacterium araucananum LM-19-Fp(T) 野黃芩苷
大腸埃希 黃芩苷
白布勒擔孢酵母 萊苞迪甙A
土曲霉 遠志皂苷元
柱孢犁頭霉黑色變種 遠志酸
水稻節(jié)桿 異歐前胡
葡萄座腔 歐前胡
齒白木層孔 染料木苷
耐久腸球 黃豆黃
醬油曲霉 大豆苷
腐皮鐮孢 大豆苷元
產二鏈霉 染料木
Microbacterium trichothecenolyticum 鏈霉蛋白