以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Medroxyprogesterone醋酸鹽是孕酮受體激動(dòng)劑,是合成的人激素孕酮變體。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:71-58-9 別名:Medroxyprogesterone 17-acetate;MPA 純度:99.02% 分子量:386.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽伊托必利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acid電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體包裝25g
鹽依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acidEGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g
鹽乙?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g
鹽乙立松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Shikimic acid磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體包裝5g
鹽異(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Shikimic acid磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝100g
鹽異腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Riociguat嗜性粒過氧化物抗體包裝10g
鹽左西替利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pheniramine Maleate核內(nèi)切G抗體包裝25g
鹽左旋咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g
鹽左氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Linaclotide 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體包裝100ml
氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: benzoylpaeoniflorin 磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml
氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g
葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alisol A 24-acetate泛交聯(lián)抗體包裝250mg
伊潘立(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g
伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sclareolide磷化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體包裝25g
伊索拉定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sclareolide乙酰基轉(zhuǎn)移EID1抗體包裝5g
: IFFI06005資源名稱: 嗜乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:potency>980ug/mg,BR糖原合成激3試劑盒桑皮苷A;mulberroside A
土地戈登氏菌Gordonia│terrae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖原合成激試劑盒麝香;3-Methylcyclopen
果生鏈核盤菌Monilinia│fructigena Honey 質(zhì)量規(guī)格:94.0-105.0%,USP,BR糖原合成ELISA Kit天然;Borneol
孕酮受體激動(dòng)劑(Medroxyprogesterone )小鼠抑制B蓖麻子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠抗抗體蝙蝠葛(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人抗肌動(dòng)蛋白抗體蝙蝠葛諾林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠促狀腺釋放激蝙蝠葛蘇林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠狀旁腺激扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人蛋白3抗體扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠促上皮質(zhì)激釋放激表白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠組表兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat