產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):突變型EGFR抑制劑(Mutated EGFR-IN-1)
英文名稱(chēng):Mutated EGFR-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Mutated EGFR-IN-1是突變型EGFR(L858R EGFR,Exonl9缺失活化突變和T790M抗性突變)抑制劑的中間體。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1421372-66-8 純度:99.88% 分子量:445.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
里亞氏須腹菌Saccharomyces cerevisiae
黃傘(黃柳菇)Candida sp.
水稻彎孢Candida sp.
假灰鏈霉菌Candida sp.
黑根霉菌Candida sp.
糞腸球菌Candida sp.
變灰青霉Candida sp.
黃赭色鏈霉菌Candida sp.
Bacillus aryabhattaiCandida sp.
嗜熱脂肪地芽孢桿菌Candida sp.
頭孢屬Candida sp.
釀酒酵母Candida sp.
丁梭菌*Candida sp.
不動(dòng)桿菌Candida sp.
腸球菌屬Candida sp.
植物乳桿菌Candida sp.
小鼠β內(nèi)酰抑制劑(BLI)免疫試劑盒骨髓基質(zhì)干抗原2抗體人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab) 山梗菜堿
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)免疫試劑盒組蛋白相關(guān)Bmi1抗體人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab) 山姜
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體人單核增多性李斯特菌O((LLO) 山椒子烯
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)免疫試劑盒大腦富含鳥(niǎo)苷激相關(guān)蛋白抗體人單核增多性李斯特菌O((LLO) 山椒子烯
突變型EGFR抑制劑(Mutated EGFR-IN-1)SPTLC1 英文名稱(chēng): 絲酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
phospho-E2F1 (Ser332) 英文名稱(chēng): 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml
P2Y1受體抗體 Anti-P2Y1 receptor 0.2ml
Anti-Sox2/FITC 熒光素標(biāo)記胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKBIB (Ser23) 磷酸化KB抑制蛋白β抗體 規(guī)格 0.1ml
ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 腎上腺素能受體β3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)