泛HER激酶不可逆抑制劑（Poziotinib）

泛HER激酶不可逆抑制劑（Poziotinib）公司正在出售的產(chǎn)品：CCK8/FITC 熒光標(biāo)記膽囊收縮/縮膽囊抗體(八肽)硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder
CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光標(biāo)記嗜粒趨化蛋白CCL1抗體IgG2-氟-5- 98%
CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 熒光標(biāo)記巨噬炎性蛋白1α抗體IgG七氟丁

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

屎腸球菌沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)

金針菇S相激相關(guān)蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)

干酪乳桿菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4Anti-ECRG4 Antibody人角蛋白13(CK-13)

枯斑擬盤多毛孢碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白13(CK-13)

Lactococcus sp.線粒體促凋亡蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白17(CK17)

匍匐曲霉乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗原Anti-EEF1A1 Antibody人角蛋白17(CK17)

草青霉磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原Anti-EEF1B2 Antibody人制瘤M受體(OSMR)

Pseudarthrobacter運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗原Anti-EEF1G Antibody人制瘤M受體(OSMR)

糞纖維單胞菌磷化Smad2抗原Anti-EEF1B2 Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)

污黑腐皮殼Smad4抗原Anti-EEF2K Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)

平菇新宇711Smad 7(多肽)Anti-EFEMP1 Antibody人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)

少根根霉磷化SMAD(p-Ser425)抗原Anti-EEF2K Antibody人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)

米曲霉突觸相關(guān)膜蛋白25抗原Anti-EFEMP2 Antibody人P27蛋白(P27)

褐色諾氏菌Snail蛋白抗原Anti-EFNA2 Antibody人P27蛋白(P27)

北方蜜環(huán)菌因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗原Anti-EFNA3 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)

枝孢屬超氧化物歧化1抗原Anti-EFNB1 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)

前列腺癌相關(guān)蛋白4抗體泛養(yǎng)副球菌人膽管上皮癌細(xì)胞

線粒體導(dǎo)肽水解β抗體金黃色葡萄球菌金黃亞種人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞

富含脯蛋白15抗體日勾維腸桿菌人慢性髓系白血病細(xì)胞

香葉烯基轉(zhuǎn)移1β抗體解肝磷脂土地桿菌人永生化肝細(xì)胞
泛HER激酶不可逆抑制劑（Poziotinib）黑曲霉 靈芝馬酮

Methylobacterium tarhaniae 毛喉帖 J

短波單胞屬 毛喉帖 G

Bacillus anthracis Cohn  樹皮含滇杠柳A

阪崎腸桿 Ficaprenol 11

白色擬諾氏 Evofolin C

粟酒裂殖酵母 丁香 蕓香糖苷

科氏游動(dòng)球 Ethyllucidone

大腸桿 erythro-Guaiacylglycerol

糙梗青霉 Erythrodiol 3-palmitate

苯紫鏈霉 桐特靈堿

豆渣雅致放射毛霉 Epoxyparvinolide

季也蒙假絲酵母 表斷馬錢子甙半縮內(nèi)酯

屎腸球  ent-6,11-Dihydroxy-15-oxokaur-16

白靈菇 等效-16beta,17-二羥基-19-異貝殼杉烷酸