PI3Ks抑制劑(XL147)

PI3Ks抑制劑(XL147)公司正在出售的產(chǎn)品：ACA(Mouse centrol and centrosome antibody)ELISA Kit 小鼠抗中性粒/中心體抗體硝亞汞,二水 AR
Hpt/HP(Mouse Haptoglobin)ELISA Kit 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 硝亞汞,二水 GR
16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyest

商品介紹：

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大腸埃希氏菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF15 Antibody泛關(guān)聯(lián)蛋白2(UBAP2)

黑曲霉Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF13B Antibody泛蛋白連接E3成分N-識別蛋白4(UBR4)

褐囊蜜環(huán)菌Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF13B Antibody泛D(UBD)

堆形艾美耳球蟲Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF14 Antibody泛C(UBC)

小鵝瘟陽性血清參考品（檢驗用）Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF18 Antibody泛(Ub)

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌生物標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF4 Antibody泛醌蛋白4(UBQLN4)

枯草芽孢桿菌羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF8 Antibody泛醌蛋白3(UBQLN3)

蠟狀芽孢桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFSF8 Antibody泛醌蛋白2(UBQLN2)

灰棕褐鏈霉菌FITC標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFα Antibody泛醌蛋白1(UBQLN1)

枯草芽孢桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-TNFα Antibody泛核蛋白2(UBN2)

間型小克銀漢霉羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNNI2 Antibody泛核蛋白1(UBN1)

土曲霉FITC標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNNC1 Antibody泛色C還原核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)

立枯絲核菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNNT2 Antibody反式高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)蛋白2(TGOLN2)

吸水鏈霉菌紫色變種膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNR Antibody翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)

豇豆慢生根瘤菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNNT3 Antibody法尼酯X受體(FXR)

釀酒酵母APC標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TNXB Antibody法尼基轉(zhuǎn)移β(FNTβ)

組蛋白賴去甲基化PHF8抗體腸膜明串珠菌人胰腺組織提取物

原鈣粘蛋白γC5抗體Dokdonellafugitiva人乳腺組織提取物

山核桃樣蛋白1抗體Dokdonellaginsengisoli人淋巴管組織提取物

炎癥因子3抗體穿透短短芽孢桿菌人子宮組織提取物
PI3Ks抑制劑(XL147)矩圓黑盤孢 降氧化北美黃連次堿

谷氨酸棒桿 異胡豆苷

腐皮殼 珊瑚菜

海泥黃桿 鳳仙萜四苷C

白球擬酵母 α-雙氫

大腸埃希 升麻苷升麻苷

炭疽芽胞桿 丹參B

魚肉 揮發(fā)性鹽基氮 化矢車菊-3-O-槐糖苷

熱帶假絲酵母 環(huán)氧長春堿，長春

栗疫 丁香亭-3-O-葡糖苷

聚生殼 長春地辛

慢葡萄球 五內(nèi)脂

竹針孢座囊 重樓皂苷F

嬰兒配方乳粉 、鈉、鈣、鎂、銅、鐵、鋅、磷、 、 10-硝基

果生鏈核盤 10-硝基