Pim抑制劑（TCS-PIM-1-4a）

Pim抑制劑（TCS-PIM-1-4a）公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-Syk (Tyr323) /FITC 熒光標(biāo)記化受體型酪氨蛋白激抗體IgG
Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光標(biāo)記化受體型酪氨蛋白激抗體IgG
SYT3/FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白3抗體IgG
SAP-1/FITC 熒光標(biāo)記抗突觸抗體IgG
Synapsin I /FITC

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

黑曲霉Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠抗凝血受體(ATR)

類干酪乳桿菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠凝血受體(TR)

大腸桿菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠凝血受體(TR)

凍土毛霉Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

費(fèi)氏中華根瘤菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

HIV假病 YA194-5Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠磷肌3激(PI3K)

灰葡萄孢Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠磷肌3激(PI3K)

香菇Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠蛋白激B(PKB)

副凝聚小短桿菌Pseudomonas putida大鼠蛋白激B(PKB)

叢毛單胞菌Pseudomonas putida大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)

稻平臍蠕孢Pseudomonas putida大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)

艾丁湖喜鹽芽孢桿菌Pseudomonas putida大鼠血紅氧合2(HO-2)

似臘蘑Pseudomonas putida大鼠血紅氧合2(HO-2)

枝狀枝孢Pseudomonas putida大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)

球孢白僵菌Pseudomonas putida大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)

多殺性巴氏桿菌Pseudomonas putida大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)

配對盒同源基因4抗體猴頭菌尿(UA)比色法測試盒

核糖體S6蛋白激β2抗體尖鐮孢黃瓜?；停S瓜枯萎病菌）尿比色法測試盒(脲法

P21蛋白激活的蛋白激6抗體尖鐮孢西瓜?；?西瓜枯萎病菌)肌酐(Cr)比色法測試盒(肌氧化法)

N-乙酰基轉(zhuǎn)移2抗體火木層孔菌(桑黃)基蛋白 基蛋白  基蛋白  基蛋白  基蛋白
Pim抑制劑（TCS-PIM-1-4a）枯草芽孢桿枯草亞種 番瀉苷元B

平臍儒孢 煙酰

蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 番瀉苷元A

谷棒桿 維生K3

平菇(武漢39號) 洋川芎內(nèi)酯I

釀酒酵母 維生K1

泡盛曲霉煙色變種 洋川芎內(nèi)酯H

棕櫚發(fā)酵桿 洋川芎內(nèi)酯A

高杰氏鏈霉 維生D3

鏈格孢 維生D2

釀酒酵母 桑根酮C

米舒青霉 

唾液乳桿水楊亞種 大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷

Sporobolomyces 維生A醋酸酯

雙孢菇 偽金絲桃