PI3Kβ抑制劑(AZD 6482)

PI3Kβ抑制劑(AZD 6482)公司正在出售的產(chǎn)品：ER- Beta/FITC 熒光標(biāo)記雌激受體β 抗體IgG氫 ACS,48%
Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化雌激受體α抗體IgG氫 48 wt. % in H2O, ≥99.99%
Phospho-Estrogen Receptor α (Ser104/10

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
多主葡萄殼菌人表皮生長(zhǎng)因子Anti-NOXO1 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)

葡萄座腔菌人堿性成纖維生長(zhǎng)因子Anti-NOX3 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)

糙皮側(cè)耳大鼠可溶性CD14Anti-NPAS1 Antibody人骨膠原交聯(lián)(Cr)

變平滑假絲酵母小鼠β淀粉樣蛋白1-42Anti-NPAS2 Antibody人骨膠原交聯(lián)(Cr)

*灰葡萄孢大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激Anti-NPHP4 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)

枯草芽胞桿菌小鼠8羥基脫氧鳥苷Anti-NPDC1 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)

考克氏菌屬人巨噬炎性蛋白5Anti-NPDC1 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)

水稻節(jié)桿菌小鼠白介1受體拮抗劑Anti-NPRL2 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)

果生鏈核盤菌大鼠雄激Anti-NR1I3 Antibody人吡啶交聯(lián)物(PY)

薄層菌屬人可溶性E選擇Anti-NR4A3 Antibody人吡啶交聯(lián)物(PY)

西唐氏鏈霉菌人可溶性間粘附分子1Anti-NR2F2 Antibody人骨橋(OPN)

黑曲霉小鼠降鈣原Anti-NRAS Antibody人骨橋(OPN)

*灰葡萄孢大鼠Toll樣受體4Anti-NRAS Antibody人γ基丁(GABA)

熒光假單胞菌大鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Anti-NRBF2 Antibody人γ基丁(GABA)

大腸埃希氏菌小鼠胰島自身抗體Anti-NRIP3 Antibody人P物質(zhì)受體(SP-R)

擴(kuò)展短桿菌人間粘附分子2Anti-NRIP2 Antibody人P物質(zhì)受體(SP-R)

核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體長(zhǎng)柄條孢牛肝人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞

環(huán)指蛋白213蠟?zāi)偃薚淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系

Rap2A抗體猴頭人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株

受體表達(dá)蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體FV21（金針菇）C57小鼠黑色瘤瘤株
PI3Kβ抑制劑(AZD 6482)肉桿 雙吡唑酮

枯草芽孢桿枯草亞種 苯甲酰三氟酮

韓國假單胞 亞芐基酮

香菇 4-氨基苯乙酮

卵形巴貝斯蟲（遼陽株） 3-氨基苯乙酮

紅淡紫灰鏈霉 4-氨基安替比林

根瘤 1，3-二羥基酮

釀酒酵母 聚乙烯吡咯烷酮

梅林青霉 聚乙烯吡咯烷酮

弧 聚乙烯吡咯烷酮

細(xì)黃鏈霉 交鏈聚乙烯吡咯烷酮

 試劑

黃孢鏈霉 腎上腺酮

蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 乙酰丁香酮

粘質(zhì)沙雷氏 碳酸胍