產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Src激酶家族抑制劑(SU6656)
英文名稱:SU6656
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SU6656是Src激酶家族抑制劑,對(duì)Src、Yes、Lyn和Fyn的IC50值分別為280、20、130和170nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):330161-87-0 純度:98.24% 分子量:371.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸桿菌超氧化物歧化2抗原Anti-EFNA4 Antibody人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)
產(chǎn)紅青霉生長(zhǎng)抑抗原Anti-EFTUD2 Antibody人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)
草青霉胚胎干關(guān)鍵蛋白Anti-EFNB2 Antibody人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)
蠟狀芽孢桿菌SP1轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子抗原Anti-EFNB3 Antibody人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)
丁香葉點(diǎn)霉富含半胱的性分泌蛋白抗原Anti-EGF Antibody人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)
微紫青霉血清應(yīng)答因子抗原Anti-EGR3 Antibody人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)
中國臺(tái)灣根霉固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原Anti-EGFR Antibody人粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
嗜麥芽黃單胞菌絲抑制蛋白激C底物抗原Anti-EHHADH Antibody人粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
米曲霉階段特異性胚胎表面抗原-1抗原Anti-EGR-1 Antibody人腸三葉因子(ITF)
球孢白僵菌生長(zhǎng)抑受體1(SSTR1)抗原Anti-EHHADH Antibody人腸三葉因子(ITF)
蘇云金芽孢桿菌生長(zhǎng)抑受體2抗原Anti-EIF1AY Antibody人Dickkopf 1(DKK1)
枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)抑受體3抗原Anti-EIF1AY Antibody人Dickkopf 1(DKK1)
根瘤菌屬生長(zhǎng)抑受體5抗原Anti-EIF2AK1 Antibody人激肽釋放11(KLK 11)
彎孢菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原Anti-EID1 Antibody人激肽釋放11(KLK 11)
紅酵母屬磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原Anti-EIF2AK3 Antibody人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)
球孢白僵菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原Anti-EIF2AK2 Antibody人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)
Rho鳥甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體無乳鏈球菌人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞
維生K依賴的蛋白C輕鏈抗體側(cè)孢短芽孢桿菌人類B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
蛋白調(diào)解因子10抗體芽孢桿菌人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞
絲蛋白2抗體銅綠假單胞菌豬腎細(xì)胞
Src激酶家族抑制劑(SU6656)雪白根霉 Enniatin B
沃氏富鹽 enantio-7(11)-Eudesmen-4-ol
多生青霉 海膽靈
釀酒酵母 Echinoynethiophene A
大腸埃希 Echinophyllin C
枯草芽胞桿 蛻皮甾酮-20,22-單酮化物
梭形芽孢桿 脫皮甾酮 2,3:20,22-二縮酮
喜鹽裸囊 蛇莓甙A
大腸埃希 Di-O-methylcrenatin
薩克普奇尼亞串孢變種 乙酸二聚松柏酯
嗜鹽喜鹽芽孢桿 去氧巴醌
多毛青霉 脫氧
大豆慢生根瘤 De-O-甲基乙酰香蘭酮色烯
分枝節(jié)桿 Demethylvestitol
三葉草根瘤 Decursidate
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)