酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)

酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)公司正在出售的產(chǎn)品：CENPA /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠著絲粒蛋白A抗體IgG2,3,5-三苯 98%
Phospho-CENP-A (Ser7)/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化著絲粒蛋白A抗體IgG2-氟-5-氧苯 95%
Phospho-HER3(Tyr1197) /FITC 熒光標(biāo)記化HER3受體抗體IgG噻吩-2-頻哪酯 98%
Ph

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雞矢藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Monensin sodium salt富含亮重復(fù)蛋白6抗體包裝1g

雞血藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Monensin sodium salt低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體（抑制腫瘤蛋白7）包裝25g

雞眼睛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hippuric acid磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝5g

積雪草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Avicularin低密度脂蛋白受體抗體包裝100g

積雪草苷B英文名稱： Pimobendan瘦抗體包裝25g

積雪草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Amino-4'-fluorobenzophenone 腫瘤自身抗原LMO4抗體包裝500g

積雪草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-amino-4'-chlorobenzophenone 淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝1g

吉馬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Protostemonine白免疫球蛋白樣受體8抗體包裝25g

吉祥草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bullatine A白三烯B4受體1抗體包裝5g

急性子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ophiopogonin D'白免疫球蛋白樣受體6抗體包裝1g

蒺藜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BendrofluMethiazide淋巴活化基因-3抗體包裝5g

蒺藜皂苷D英文名稱： Plumbagin白相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體包裝1g

蒺藜皂苷K英文名稱： Lapachol 白分化抗原CD207抗體包裝5g

己可可堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Armillarisin A白三烯B4受體2抗體包裝25g

加蘭他敏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 17α-Hydroxypregnenolone白相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體包裝5g

干酪乳桿菌干酪亞種Lactobacillus│casei subsp.casei 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白試劑盒非洲防己堿;Columbamine

米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：≥97.0%,BR抗殺菌通透性增高蛋白抗體試劑盒佛司可林;Forskolin

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗腮腺管抗體試劑盒伏格列波糖;Voglibose
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)蘇云金芽孢桿 4-氨基二苯硫酸鹽甘薯病CElisa

弗吉尼亞鏈霉 10-甲氧基亞氨基芪D-果糖Elisa

擬莖點(diǎn)霉屬 4-溴苯乙抗肽Elisa

橙色嗜熱子囊 苯頻哪凝集Elisa

鍺栓孔 環(huán)己烷羧酸甲酯酚氧化Elisa

米曲霉 1-溴-3,5-二氟苯過氧化氫Elisa

戊糖片球 2-氟-4-甲基吡啶超氧化物歧化Elisa

單增李斯特氏 DL-肉堿酚氧化Elisa

枯草芽孢桿 對(duì)氟苯乙抗壞血酸Elisa

果生鏈核盤 對(duì)氟苯乙酰氯磷酸烯式酮酸Elisa

美澳型核果褐腐病 3-氟芐腺嘌呤核苷三磷酸Elisa

凝結(jié)芽胞桿 3-氟芐氯蛋白磷酸2AElisa

短小芽孢桿 3-氟芐氯膨脹Elisa

草色串孢 3-氟芐溴多聚組氨酸標(biāo)簽Elisa

多座蟲草* 4-嘧啶酮δ-氨基-γ-酮戊酸Elisa