商品介紹:
Danusertib是一種激光激酶(aurora kinase)抑制劑,能夠抑制Aurora A,Aurora B和Aurora C的活性,IC50值分別為13,79和61nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:827318-97-8 別名:PHA-739358 純度:99.44% 分子量:474.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
激光激酶抑制劑(Danusertib) | aurora kinase inhibitor | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
枯草芽孢桿菌PELO蛋白抗體Anti-ANGPT2 Antibody超磷化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)
相思根瘤菌P因子/備解抗體Anti-ANGPT2 Antibody腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)
枯草芽孢桿菌PSF2蛋白抗體Anti-ANGPTL3 Antibody腸三葉因子(ITF)
大腸埃希菌腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體Anti-ANGPTL1 Antibody腸病(Enterovirus)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型阿黑皮原抗體Anti-ANGPTL2 Antibody層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)
韌革菌屬腸道病71型/手足口病病抗體Anti-ANGPTL3 Antibody層粘連蛋白β1(LN-β1)
Lysinibacillu xylanilyticus蛋白質(zhì)磷2B抗體 PP2A β PP2A-βAnti-ANGPTL8 Antibody層粘連蛋白-5(LN-5)
陰溝腸桿菌胞粘蛋白1抗體抗體Anti-ANGPTL4 Antibody層粘連蛋白(LN)
大腸埃希氏菌絲/蘇蛋白激18Anti-ANLN Antibody層連蛋白/板層(LN)
慢生根瘤菌表面受體PILRβ抗體Anti-Annexin IV Antibody布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種孤兒核受體PAR1抗體Anti-ANO1 Antibody布盧姆綜合征蛋白(BLM)
pGLuc-Basic多型性腺瘤基因1蛋白抗體Anti-ANO1 Antibody不透光相關蛋白(OPAs)
節(jié)桿菌屬早幼粒白血病鋅指蛋白抗體Anti-ANPEP Antibody不耐熱腸B亞單位(LTB)
白腐盾殼霉骨架蛋白C端PDLIM1抗體Anti-ANPEP Antibody不對稱二甲基精(ADMA)
香茅假單胞菌腫瘤抑制基因野生型P53單抗Anti-ANXA1 Antibody補體因子I(CFI)
少根根霉磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體Anti-ANXA10 Antibody補體因子H相關蛋白1(CFHR1)
: D50資源名稱: 丁香直絲鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
中華被毛孢Hirsutella sinensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
激光激酶抑制劑(Danusertib)梨形卷枝霉 檢定培養(yǎng)基3號(usp)性別決定區(qū)Y框蛋白9Elisa
云芝栓孔(變色栓) 檢定培養(yǎng)基1號(PH6.5-6.7)聚集蛋白聚糖Elisa
釀酒酵母 大腸桿成套(新國標)雌受體Elisa
釀酒酵母 N,N’-二環(huán)己基脲脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
毛頭鬼傘 采樣吸取液1-GVPC液體培養(yǎng)基添加劑apelin 13Elisa
蠟狀芽孢桿 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)(新藥典)環(huán)孢AElisa
解淀粉芽孢桿 BM液體培養(yǎng)基Scleraxis同源物AElisa
根瘤 2-巰基苯并惡唑血清淀粉樣蛋白AElisa
黃海海桿狀 BM固體培養(yǎng)基抗心磷脂IgG抗體Elisa
消化乳桿 含糖牛肉湯培養(yǎng)基可溶性白分化抗原14亞型Elisa
釀酒酵母 石蕊牛奶培養(yǎng)基色上皮衍生因子Elisa
黑曲霉 2,3-二甲基喹喔啉組蛋白H3Elisa
檸條根瘤 乳酸桿選擇性肉湯組蛋白H4Elisa
葡萄枯萎病 牛奶培養(yǎng)基可溶性血管粘附分子1Elisa
冷溫木拉克酵母 卵磷脂吐溫稀釋液鈣調(diào)神經(jīng)磷酸Elisa