BLM解螺旋酶抑制劑（ML216）

BLM解螺旋酶抑制劑（ML216）公司正在出售的產(chǎn)品：EXPB-2/FITC 熒光標(biāo)記植物延展-βIgG鹽土霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Ezrin/Radixin/FITC 熒光標(biāo)記埃茲蛋白抗體IgG鹽土霉 BP2007,藥用級
Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化埃茲蛋白抗體IgG葡聚糖40 分子量40000
Phospho-Ezrin (Thr567)

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

葡萄座腔菌小鼠血小板因子3Anti-NTS Antibody大鼠一氧化氮(NO)

福氏志賀氏菌大鼠胰島自身抗體Anti-NUB1 Antibody大鼠一氧化氮(NO)

釀酒酵母人血管內(nèi)皮生長因子受體1Anti-NUMA1 Antibody人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

熒光假單胞菌生物型F小鼠白介2受體Anti-NUP35 Antibody人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

魯氏酵母大鼠抗核膜糖蛋白210抗體Anti-NUP93 Antibody人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)

諾爾氏菌屬小鼠腎上腺髓質(zhì)Anti-NUP160 Antibody人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)

釀酒酵母大鼠可溶性Toll樣受體6Anti-NUP88 Antibody人脂聯(lián)(ADP)

新疆黃桿菌人血管內(nèi)皮生長因Anti-NUSAP1 Antibody人脂聯(lián)(ADP)

紅蠟盤菌人血管內(nèi)皮生長因子CAnti-NUTF2 Antibody人組(HIS)

根瘤菌大鼠可溶性Toll樣受體2Anti-NVL Antibody人組(HIS)

東方伊薩酵母小鼠可溶性瘦受體Anti-NUTM1 Antibody人抵抗(Resistin)

湖沉積物紫色小桿菌人血管內(nèi)皮生長因子BAnti-NXF1 Antibody人抵抗(Resistin)

盤多毛孢大鼠前列腺F2αAnti-NXF3 Antibody人骨特異性堿性磷B(ALP-B)

不動桿菌小鼠β內(nèi)啡肽受體Anti-NXF1(TAP) pAb人骨特異性堿性磷B(ALP-B)

辣乳菇人血管內(nèi)皮生長因子Anti-NXPH3 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

白僵菌大鼠白三烯E4Anti-NXPH1 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

視網(wǎng)膜感光細(xì)胞外節(jié)膜蛋白1抗體茶新菇ACH-4人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體紫褐牛肝菌小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

RecQ解旋樣蛋白5抗體污膠鼓菌人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

單鏈結(jié)合蛋白70抗體杯蕈2號大鼠乳腺癌細(xì)胞
BLM解螺旋酶抑制劑（ML216）耐熱鹽土生古 油酸鈉

角磷灰鵝膏 月桂酸鈉

嗜松青霉 氫鈉

假單胞屬 2-萘磷酸鈉鹽

大腸埃希 1-萘磷酸鈉鹽

釀酒酵母 二乙基二硫代鈉

大腸桿 鎢酸鈉

東海微泡 錫酸鈉

拒霉鏈霉 焦硫酸鈉

雞傷寒沙門氏 多聚磷酸鈉

莖點(diǎn)霉 磷鎢酸鈉

豬屎豆根瘤 化鈉

桃中田殼小圓孢 六偏磷酸鈉

南方青霉 亞鐵化鈉

釀酒酵母 無水偏釩酸鈉