PDE4B抑制劑（GSK256066）

PDE4B抑制劑（GSK256066）公司*的產(chǎn)品：Anti-MMP-7/PE 熒光素PE標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TRP1/gp75 /FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸酶相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABAT γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PDE4B抑制劑（GSK256066）

英文名稱：GSK256066

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

維蘭特羅英文名稱： n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)尿激型纖溶原激活因子受體抗體包裝1g

維替泊芬英文名稱： Octanedioic acid配對盒基因5抗體包裝25g

烏利司他英文名稱： Olive oilPEG3蛋白抗體包裝5g

烏司他丁英文名稱： o-Methoxycinnamaldehyde泛連接抗體包裝1g

西洛多辛英文名稱： Orcein, synthetic帕金蛋白抗體包裝25g

西米替汀英文名稱： o-Vanillin程序性死亡1抗體包裝5g

西替利英文名稱： Oxalyldihydrazide過氧化還原3抗體包裝25g

昔美沙美特羅英文名稱： Oxazole前列腺性磷抗體包裝5g

香蘭；香草英文名稱： Palladium (II) acetate蛋白激AKT底物1抗體包裝1g

溴芬鈉英文名稱： Palladium (II) chloridep21激活激1抗體包裝1g

溴夫定英文名稱： Palladium (II) nitrate dihydrate庚型肝炎病多聚蛋白抗體包裝25g

溴化新斯的明英文名稱： Palladium, powder內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪/前B克增強(qiáng)因子1抗體包裝5g

溴后馬托品英文名稱： Pararosaniline acetate胰島原抗體包裝1g

溴莫尼定英文名稱： Paxilline*, from Penicillium paxilli平足蛋白gp36/淋巴管內(nèi)皮蛋白抗體包裝5g

鹽阿比朵爾英文名稱： Penicillic acid核苷內(nèi)焦磷/磷二酯1抗體包裝1g

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激2試劑盒阿魏鈉;Sodium ferulic

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1試劑盒桉油精;Cineole

黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品含SET域4試劑盒阿魏;Ferulic acid
PDE4B抑制劑（GSK256066）轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體苦參新F Pulchinenoside B

神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子LDB1抗體苦地?。?biāo)準(zhǔn)品） V

白化學(xué)吸引2抗體苦鬼臼 Mogroside IVa

LHX5蛋白抗體苦楝皮（標(biāo)準(zhǔn)品） isomogroside V

單絲蛋白激1+2抗體苦木（標(biāo)準(zhǔn)品） Sinomenine HCl

LIN7C蛋白抗體苦蘇花皂苷C Sinomenine

富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體苦杏仁（標(biāo)準(zhǔn)品） DNA.Na

富含亮α2糖蛋白抗體苦玄參（標(biāo)準(zhǔn)品） RNA

腦特異性磷脂磷樣蛋白1抗體苦玄參苷IA（標(biāo)準(zhǔn)品） Uridine-5-diphosphoglucose disodium salt