產(chǎn)品屬性:
中文名稱:KDM5B抑制劑(AS8351)
英文名稱:AS8351
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AS8351是一種KDM5B抑制劑,可以誘導(dǎo)和維持有活性的染色質(zhì)標(biāo)記從而促進(jìn)心肌細(xì)胞樣細(xì)胞的產(chǎn)生。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):796-42-9 純度:99.70% 分子量:291.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
芐雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anidulafungin著絲粒蛋白Q抗體包裝1g
別嘌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ansamitocin P-3CENTA2蛋白抗體包裝5g
泊酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aprepitant胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體包裝1g
谷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tenofovir磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體包裝25g
磺舒(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TenofovirCENTD1蛋白抗體包裝5g
硫氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AripiprazoleCENTG3蛋白抗體包裝100ml
硫異煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aripiprazole中心體蛋白3抗體包裝25ml
睪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ascomycin,FK520中心體蛋白1+2抗體包裝500ml
交沙霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ascomycin,FK520中心體蛋白2抗體包裝25g
倍他索(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atazanavir中心體蛋白CEP120抗體包裝5g
戊鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atazanavir中心體蛋白CEP128抗體包裝5g
戊鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atomoxetine HCl中心體蛋白CEP170抗體包裝1g
波生坦合(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atomoxetine HCl尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝25g
泊沙康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atovaquone銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白CUTC抗體包裝5g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AtovaquoneCUTL1蛋白抗體包裝1g
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化試劑盒香蒲新苷;typhaneoside
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%血管緊張Ⅰ受體抗體試劑盒辛夷脂;Fargesin
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管緊張Ⅰ試劑盒小豆蔻明;cardamonin
KDM5B抑制劑(AS8351)銜接蛋白β抗體Ⅷ(FⅧ)檢測(cè)試劑盒FⅧ ELISA Kit
銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體Ⅶ(FⅦ)檢測(cè)試劑盒FⅦ ELISA Kit
水通道蛋白-9抗體Ⅵ(FⅥ)檢測(cè)試劑盒FⅥ ELISA Kit
膜粘連蛋白A3抗體Ⅴ(FⅤ)檢測(cè)試劑盒FⅤ ELISA Kit
膜粘連蛋白 A4抗體Ⅳ(FⅣ)檢測(cè)試劑盒FⅣ ELISA Kit
自噬相關(guān)蛋白8A抗體Ⅲ(FⅢ)檢測(cè)試劑盒FⅢ ELISA Kit
磷化蛋白激B抗體Ⅱ(FⅡ)檢測(cè)試劑盒FⅡ ELISA Kit
磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體Ⅰ(FⅠ)檢測(cè)試劑盒FⅠ ELISA Kit
磷化蛋白激B抗體凝血原片段F1+2(F1+2)檢測(cè)試劑盒F1+2 ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)