商品介紹:
Exemestane(FCE24304)是芳香酶(aromatase)抑制劑,能抑制人胎盤和鼠卵巢芳香酶,IC50分別為30nM和40nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:107868-30-4 別名:FCE 24304;EXE 純度:97.77% 分子量:296.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乳乳球菌乳亞種Pseudomonas putida大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
三葉草根瘤菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
弗雷德里克斯堡假單胞菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)
人纖維單胞菌Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)
燕麥嗜菌西瓜亞種*Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)
Penicillium Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)
干巴菌*Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)
大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)
季也蒙畢赤酵母Pseudomonas putida大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)
柑橘炭疽盤孢菌Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
雅致放射毛霉Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
食砜節(jié)桿菌Pseudomonas putida大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)
粉被蟲草Pseudomonas putida大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)
澳型核果褐腐病菌Pseudomonas putida大鼠激M2型同工(M2-PK)
α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體白阿魏菇比色法測試盒
泛樣蛋白Sumo2/3抗體鮑魚側(cè)耳BCA 蛋白濃度測定試劑盒
肺表面活性蛋白C前體肽抗體皺蓋假芝(血芝)總羰基含量比色法測試盒
Syndecan3蛋白抗體血紅栓菌總蛋白(TP)比色法測試盒(雙縮脲法)
芳香酶(aromatase)抑制劑(Exemestane)澳大亞平臍蠕孢 茯苓酸
解脂耶羅威亞酵母 維生A棕櫚酸酯
香菇—L2414-4 維生A
球孢白僵 氧化芍藥苷
孢吸水鏈霉 維生A
尼氏芽孢桿 新內(nèi)酯
巴特艾耳球蟲 N-羥基琥珀酰亞生物
鏈格孢(只確定屬) 基苯酞
溶桿 D-生物
皺褶假絲酵母 桑皮苷C
蘇云金芽孢桿猝倒亞種 β-胡蘿卜
芽孢桿屬 桑皮苷A
腸膜明串珠 維生C鈉
米根霉 桑辛
亞黃八疊球 維生C