巴氏染色液(EA36)

巴氏染色液(EA36)公司*的產(chǎn)品：Phospho-YB1 (Ser102) 化高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體纖維 40000mPa.s
F1 protein (YERSINIA PESTIS) 鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體纖維 100000mPa.s
XIAP X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體對(duì) AR,99.0%
YY1 核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體2-氨吡啶 CP
XA

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：巴氏染色液(EA36)

英文名稱：Papanicolaou EA36

產(chǎn)品規(guī)格：4×100ml|4×250ml|4×500ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

脫氧野尻霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： E64d,E-64d組蛋白H2AZ抗體包裝5g

拓?fù)涮婵蝶}鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： dCMP,2Na熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體包裝1g

瓦松（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphateHEATR2蛋白抗體包裝1g

萬(wàn)丈深（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FAD-Na2鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體包裝25g

萬(wàn)丈深（綠莖還陽(yáng)參）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GTP, 3sodium Salt麻疹病血凝抗體包裝5g

王不留行（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-IMP，2Na同源盒蛋白HOXC5抗體包裝1g

王不留行環(huán)肽A英文名稱： Uridine 5'-diphosphate sodium salt from 轉(zhuǎn)錄因子HES4抗體包裝5g

王不留行環(huán)肽B英文名稱： 5'-UMP-Na2造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白3抗體包裝1g

王不留行黃苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Disodium salt(dAMP-Na2)HDHD1蛋白抗體包裝5g

威靈仙(綿團(tuán)鐵線蓮）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5'-ATP-Na2HDHD2蛋白抗體包裝100g

威靈仙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (YN968D1)宿主因子1抗體包裝25g

維采寧2英文名稱： cAMP組蛋白H2A/S抗體包裝5g

維生B2（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： cAMP組受體H2抗體包裝100g

維生D2（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytidine 5'-monophosphate 磷化組受體H1抗體包裝25g

維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-...英文名稱： 5-Formylsalicylic acid同源盒蛋白HOXA11抗體包裝5g

黃孢原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng)免疫球蛋白輕鏈kappa試劑盒六氫吡啶羧;DL-Pipecolini

大腸埃希氏菌DH5a/pBAD-MyC-HisC/PasecA N236HEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白結(jié)合蛋白試劑盒絡(luò)塞維;Rosavin

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格：>98%免疫球蛋白γ-1 鏈C 區(qū)試劑盒諾米林;nomilin
巴氏染色液(EA36)皮氏羅爾斯通氏 N,N-二芐基羥磷酸甘油酸脫氫Elisa

短小芽孢桿 2-氯-5-甲酯輕鏈鐵蛋白Elisa

固氮 L-氨酰-L-氨酰-L-氨基酸甲基酯醋酸鹽糖基化CD59Elisa

蠟狀芽孢桿 (R)-1-Cbz-2-基吡咯烷鐵蛋白重鏈Elisa

環(huán)棱褐孔 三芐色P4502B6Elisa

殼 5-降烯-2-羧酸甲酯生四烯酸-15-脂加氧Elisa

谷氨酸棒桿 2,2'-Bis(diphenylphosphino)biphenyl15-羥基PGD2脫氫Elisa

活潑微球 3-甲脂氧合同工5Elisa

翹鱗香菇 間氯氯芐抗凝血IgM抗體Elisa

鏈格孢 鄰苯二甲酸二癸酯信號(hào)7AElisa

白腐 3-乙基凋亡蛋白激活因子1Elisa

粘絲膜 3-甲基芐溴T轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Elisa

霍氏格里蒙特氏 2-氨基二酰凋亡有關(guān)蛋白激2Elisa

美澳型核果褐腐病 2,5-二氯吡啶-4-酸線粒體羥甲基戊二酸單酰合2Elisa

好食脈孢 4-氯苯甲酰核糖核酸A3Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)