EGFR和ErbB2抑制劑(AST-1306 TsOH)

EGFR和ErbB2抑制劑(AST-1306 TsOH)公司正在出售的產(chǎn)品：PDGF-B/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長因子-B抗體IgG蒽 98%
PDGF-BB/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長因子-BB抗體IgG蒽 standard for GC, ≥99.5% (GC)
PDGF-R-A/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長因子受體-A抗體IgG咔唑 CP
Phospho-PDGF R

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

枯草芽孢桿菌枯草亞種人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子Bacillus thuringiensis小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)

白僵菌人IPO-38蛋白Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

枯草芽孢桿菌人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

銅綠假單胞菌人羰基化蛋白Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

綠色木霉人磷化核因子κB抑制蛋白α（IKKα human ELISA kit）Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

釀酒酵母人樁蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)

彎孢人小表皮粘蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)

大腸埃希菌人類似60S核糖體蛋白L21Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)

紫色鏈霉菌人類粘蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)

平滑假絲酵母人MAX二聚化蛋白1Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

硬皮馬勃屬人水閘蛋白14Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

銹色野野村氏菌人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)

乳粉  沙門氏菌（陰性）人主要穹窿蛋白Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)

小卷霉人泛蛋白DBacillus thuringiensis小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)

露濕漆斑菌人toll樣受體2Bacillus thuringiensis小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)

米根霉年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)

少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2抗體豹斑毒鵝膏菌正常大鼠腎細(xì)胞

增食欲B/欲激B亞巴馬全緣孔菌洲綠猴腎細(xì)胞

寡腺苷合成-1斑點(diǎn)嗜藍(lán)孢孔菌人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株

陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體小果雞樅小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P-1（干細(xì)胞庫保藏）
EGFR和ErbB2抑制劑(AST-1306 TsOH)銹赤蠟黃鏈霉 青霉鏈霉兩性霉B溶液

紫紅曲霉 柳穿魚黃

枯草芽孢桿 戈米辛J

迂回殼囊孢 青霉鏈霉溶液

草假單胞 青霉

大腸埃希氏 偽綿馬

鄉(xiāng)間假絲酵母 青霉鈉

綠色產(chǎn)色鏈霉 制霉

短波單胞屬 新霉硫酸鹽

叢赤殼 6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷

球孢白僵 寡霉

氈毛青霉 仙鶴草D

凝結(jié)芽孢桿 

巨大芽胞桿 那霉硫酸鹽

釀酒酵母 慶大霉硫酸鹽