以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Btk抑制劑(CGI-1746) | CGI-1746 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
CGI-1746是一種有效的,高選擇性的Btk抑制劑,IC50值為1.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):910232-84-7 純度:96.62% 分子量:579.69 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
*美味牛肝菌肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體Human HSPB2 ELISA Kit小鼠結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒
香菇β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β)Human HuR ELISA Kit小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)免疫試劑盒
魯氏毛霉乙酰結(jié)合蛋白抗體Human HSPB8 ELISA Kit小鼠角化生長(zhǎng)因子(KGF/FGF-7)免疫試劑盒
糾纏青霉磷化分裂周期蛋白16抗體Human HSPB7 ELISA Kit小鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
腐皮鐮孢白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體Human HSN2 ELISA Kit小鼠膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
阿舒多囊霉活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫抗體Human HURP ELISA Kit小鼠膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒
淡紫紫霉三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體Human HUS1 ELISA Kit小鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
玫紅假裸囊菌ADP核糖基化因子3抗體Human HSPA13 ELISA Kit小鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒
乳酒假絲酵母含酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1抗體Human HSP20 ELISA Kit小鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
山岡單胞菌粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human HUS1B ELISA Kit小鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
哈茨木霉卡爾曼綜合癥基因1抗體Human HSPB2 ELISA Kit小鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒
根瘤菌含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體Human HSPA1L ELISA Kit小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)免疫試劑盒
尖孢含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體Human HSPB7 ELISA Kit小鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體Human HUS1B ELISA Kit小鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
淡黃木層孔菌鈉ATP通道蛋白抗體Human HSPA1L ELISA Kit小鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
雞縱菌AGXT2L2蛋白抗體Human HSPB2 ELISA Kit小鼠甲狀腺過(guò)氧化物(TPO)免疫試劑盒
: Ye1110資源名稱: 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 質(zhì)量規(guī)格:比活度:>1.2 U/mg,BC白介15試劑盒棗仁皂苷B1
芽孢八疊球菌(加詞待譯)Sporosarcina│globispora 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介13試劑盒3,4,5-三咖啡酰奎寧
擬盤(pán)多毛孢Pestalotiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR白介12受體亞基β-1試劑盒黃皮
Btk抑制劑(CGI-1746)商陸皂苷T英文名稱: Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g
商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g
商陸皂苷辛英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g
芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5g
芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Solanesol可溶性蘋(píng)果脫氫抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Qingyangshengenin A磷化µ-型受體抗體包裝5g
蛇膽汁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g
射干(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝250mg
麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g
伸筋草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norisoboldine單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體包裝25g
腎茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g
升麻(興安升麻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydrocostus Lactone跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體包裝250mg
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g