產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GSTP1-1抑制劑(Ezatiostat)
英文名稱:Ezatiostat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Ezatiostat是一種glutathione類似物,為谷胱甘肽S-轉移酶P1-1(GSTP1-1)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:168682-53-9 別名:TER199;TLK199 純度:96.84% 分子量:529.65 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌小鼠抗內(nèi)皮抗體Anti-PWWP3A Antibody人脂阿伯甘露聚糖(LAM)
細鏈格孢人膽Anti-PWWP3A Antibody人脂阿伯甘露聚糖(LAM)
蠟狀芽孢桿菌大鼠前列腺性磷Anti-PXMP4 Antibody人甘露糖(MN)
鉛黃腸球菌大鼠游離前列腺特異性抗原Anti-PXMP2 Antibody人甘露糖(MN)
高滲曲霉小鼠α羥基丁脫氫Anti-R3HCC1L Antibody人甘露糖受體(MR)
臭曲霉人幽門螺旋菌IgGAnti-QRFPR Antibody人甘露糖受體(MR)
意外鏈霉菌人γ谷酰轉移Anti-PYDC1 Antibody人未甲基化寡聚脫氧核苷(CpG-ODN)
乳桿菌屬大鼠前列腺特異性抗原Anti-RAB11FIP2 Antibody人未甲基化寡聚脫氧核苷(CpG-ODN)
枯草芽胞桿菌小鼠全段甲狀旁腺Anti-R3HCC1L Antibody人甲酰甲硫(fMet)
類腸膜魏斯氏菌大鼠卵巢癌標志物CA125Anti-RAB11FIP3 Antibody人甲酰甲硫(fMet)
安妥檢測試紙 (鼠藥)人胃粘液Anti-RAB20 Antibody人ICE蛋白激活因子(IRAP)
血紅栓菌小鼠中性粒彈性蛋白Anti-RAB11FIP4 Antibody人ICE蛋白激活因子(IRAP)
葡酒色傘枝霉小鼠牛小腸堿性磷Anti-RAB18 Antibody人甲基化寡核苷(NON)
島生異擔子菌大鼠癌標志物-CA153Anti-RAB26 Antibody人甲基化寡核苷(NON)
網(wǎng)狀鐮孢人透明質(zhì)結合蛋白Anti-RAB29 Antibody人蛋白Z(Protein Z)
乳白栓孔菌人Ⅰ型膠原N末端肽Anti-RAB2B Antibody人蛋白Z(Protein Z)
微管蛋白聚合促進蛋白24香菇5胎盤絨毛癌細胞
味覺2型受體蛋白家族49抗體草芽枝霉桔綠木霉
Thimet內(nèi)肽抗體細交鏈孢霉人腎母細胞瘤細胞
微管相關蛋白Tau421抗體尖鐮孢菌人胚腎細胞(ampho轉染)
GSTP1-1抑制劑(Ezatiostat)米根霉 CBZ-D-苯
根瘤 CBZ-L-苯
竹喙球 CBZ-D-
仁果叢梗孢 CBZ-L-
釀酒酵母 BOC-D-纈
屎腸球(屎鏈球) BOC-L-纈
Sphingosinicella BOC-D-色
寄生曲霉 BOC-D-絲
大腸埃希氏 BOC-L-絲
馬氏副球 BOC-硝基-L-精
大腸埃希氏 BOC-L-羥脯
豌豆根瘤(都不提供) BOC-D-苯
鏈格孢 BOC-L-酪甲酯
Bacillus BOC-L-酪
微小威斯桿 BOC-D-亮
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)