商品介紹:
用途: 細(xì)胞學(xué)樣本常規(guī)染色,尤其適用于胸、腹水、痰液等非婦科標(biāo)本的染色。 注意事項(xiàng): 巴氏染色液是用蘇木素、橙黃、磷鎢酸、亮綠等配制而成,用于處理分泌物等細(xì)胞脫落標(biāo)本,細(xì)胞核呈藍(lán)色或黑色,角化鱗狀細(xì)胞胞漿呈粉紅或橘紅色。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:巴氏染色液(EA65)
英文名稱:Papanicolaou EA65
產(chǎn)品規(guī)格:4×100ml|4×250ml|4×500ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
吳茱萸次堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NBD-F羥類固脫氫17β3抗體包裝250g
吳茱萸堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: luminol羥基類固脫氫11β1抗體包裝25g
梧桐子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BAEE滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體包裝5g
五倍子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate 乙?;M蛋白H4抗體包裝100g
五倍子(青麩楊)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Glucose 6-phosphate sodium salt 磷化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1包裝25g
五加皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: bisBenzimide H 33258 附睪分泌蛋白4抗體包裝1g
五靈脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: bisBenzimide H 33342 trihydrochloride三基化組蛋白H3抗體包裝5g
五合硫金雀花堿/硫鷹爪豆堿英文名稱: Fluo 3-AM 三羥基三基還原抗體包裝100g
五味藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indo 1-AM硫乙酰肝蛋白多糖2包裝25g
五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluo 4-AM肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25a包裝250ml
五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Amino-4-methylcoumarin 己糖激3抗體包裝50ml
五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPI-145 (INK1197)人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體包裝50mg
五味子乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: X-NeuNAc 人乙肝病pre S1蛋白抗體包裝1g
五味子酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol己糖激1抗體包裝5g
五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetradecyltrimethylammonium chloride己糖激2抗體包裝25g
粉紅粘帚霉Gliocladium│roseum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP 32免疫球蛋白G試劑盒櫟櫻;Roburic acid
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白G Fc片段試劑盒鄰氧基肉桂;2-Methoxycin
弗氏檸檬桿菌Citrobacter│freundii 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP 32免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ試劑盒雷帕霉;Sirolimus
巴氏染色液(EA65)枯草芽孢桿 酮酸乙酯Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6Elisa
黏著玫瑰變色 3,5-二氟苯乙烯酸轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員1Elisa
球孢白僵 香草酸乙酯骨形成蛋白 24Elisa
球孢白僵 2-氯-1,4-苯二硫酸鹽蛋白基因產(chǎn)物9.5Elisa
雅致放射毛霉 2-氨基-4-溴吡啶G抗原7Elisa
大腸埃希 洋縮GBU4-5Elisa
銅綠假單胞 吡-2-羧酸甲酯癌抗原Elisa
Enterobacter cowanii Inoue et al. -3-酮鹽酸鹽逆轉(zhuǎn)錄病樣天冬氨酸蛋白1Elisa
克魯弗酵母 2-氯-5-氟苯甲n-乙酰胞壁酰-l-氨酸酰氨Elisa
熱帶假絲酵母 N,N-二乙單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
蠟狀芽孢桿 1,5-二溴-2,4-二Fc受體樣蛋白3Elisa
短密青霉 2-溴戊酸乙酯甲基二酸Elisa
黃曲霉 2-氯-4-精氨酸1Elisa
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 3-氯-4-酚鳥氨酸氨甲?;D(zhuǎn)移Elisa
谷氨酸棒桿Ⅰ型 2,5-二溴甲苯鳥氨酸脫羧1Elisa