產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Myc-Max二聚化抑制劑(10074-G5)
英文名稱:10074-G5
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
10074-G5是c-Myc-Max二聚化抑制劑,IC50值為146μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):413611-93-5 純度:97.07% 分子量:332.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
嗜低溫游動(dòng)微菌Ralstonia pickettii
綠產(chǎn)色鏈霉菌Acetobacter aceti
乳粉 單核增生李斯特氏菌(陰性) Aeromonas hydrophila
澳型核果褐腐病菌Acetobacter pasteurianus
澳型核果褐腐病菌Gluconacetobacter xylinum
禾谷鐮孢Gluconacetobacter hansenii
擬黑馬朗假絲酵母Aeromonas hydrophila
棘孢木霉Burkholderia cepacia
鏈格孢菌Aeromonas hydrophila
尖孢鐮孢Aeromonas hydrophila
教酒色鏈霉菌Vibrio proteolyticus
白盤長孢Burkholderia cepacia
灰毛茄菌絨孢(茄子絨斑病菌)Alcaligenes faecalis subsp. faecalis
平菇—被氏菇Ralstonia eutropha
玉蕈(真姬菇)Variovorax paradoxus
高加索奶乳桿菌Ralstonia eutropha
豬肝生長因子(HGF)免疫試劑盒ALKB蛋白抗體人腫瘤壞死因子β(TNF-β)粗壯女貞苷N
豬甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒乙酰?;D(zhuǎn)移1抗體人腫瘤壞死因子β(TNF-β)醋棉
豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2δ(CAMK2D)免疫試劑盒磷化β-肌動(dòng)蛋白抗體人腫瘤壞死因子α(TNF-α) 醋辛酯
豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2γ(CAMK2G/CAMKG)免疫試劑盒磷化腎上腺能受體β2/β2-AR 抗體人腫瘤壞死因子α(TNF-α) 催吐蘿芙木定
c-Myc-Max二聚化抑制劑(10074-G5)SCEL 英文名稱: SCEL蛋白抗體 0.2ml
ERCC1 英文名稱: DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 0.2ml
兔抗人TIGAR蛋白抗體 Anti-TIGAR humen 0.1ml
Anti-TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子-α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser275) 磷酸化KLF5抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP receptor-I 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)