產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BRPF1Bromodoman抑制劑(PFI-4)
英文名稱:PFI-4
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PFI-4是一種有效的,滲透細(xì)胞的選擇性BRPF1Bromodoman抑制劑,IC50為80nM,作用于BRPF1比作用于其他Bromodoman(包括BRPF2/3和BRD4)選擇性強(qiáng)100多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):900305-37-5 分子量:380.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌Pseudomonas sp.大鼠周期D1(Cyclin-D1)
蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas sp.大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)
香菇Pseudomonas sp.大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)
側(cè)耳Pseudomonas sp.大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
毀滅柱孢(毀滅柱孢菌)(可訂購)Pseudomonas sp.大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
釀酒酵母Pseudomonas sp.大鼠前列腺性磷(PAP)
梭菌Pseudomonas straminea大鼠前列腺性磷(PAP)
柑橘葉點(diǎn)霉Pseudomonas stutzeri大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)
鐮刀菌Pseudomonas stutzeri大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)
黑曲霉Pseudomonas stutzeri大鼠前列腺特異性抗原(PSA)
白地霉Pseudomonas stutzeri大鼠前列腺特異性抗原(PSA)
灰離褶傘(可訂)Pseudomonas stutzeri大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125
芽孢桿菌屬Pseudomonas stutzeri大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125
人參土成對(duì)桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠癌標(biāo)志物-CA153
黃色金黃桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠癌標(biāo)志物-CA153
黃暗色鏈霉菌Pseudomonas stutzeri大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199
運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1長孢絨蓋牛肝菌葡萄糖(Glu)比色法測試盒(GOD-POD法)
S100A14/15抗體漏斗大孔菌無機(jī)鹽離子 無機(jī)鹽離子 無機(jī)鹽離子 無機(jī)鹽離子
固酰脫氫1抗體白環(huán)柄菇鐵比色法測試盒
突觸蛋白6抗體假密環(huán)菌磷(Pi)比色法測試盒(磷鉬法)
BRPF1Bromodoman抑制劑(PFI-4)灰管層孔 白綿馬AP
蕈狀芽孢桿 肌紅蛋白
四脊曲霉 金屬硫蛋白(II型)
戊糖片球 金屬硫蛋白(I型)
芽孢桿 金屬硫蛋白 混合體
毛殼 瓊脂糖蛋白A
假長隱球酵母 白綿馬AA
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 蛋白保護(hù)劑TY
鏈格孢 6-姜烯
根瘤 粘蛋白
秦氏蜜環(huán) 魯斯考皂苷元
長雙歧桿豬亞種 粘蛋白
針葉樹散斑殼 鹽酸益母草堿
中間腸桿 組蛋白A(小牛胸腺)
博伊丁假絲酵母 去甲異波爾定
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)