商品介紹:
MRX-2843是MERTK和FLT3的小分子抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1429882-07-4 別名:UNC2371 分子量:488.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠脂聯(lián)素(Acrp30)ELISA試劑盒 ,英文名: Acrp30 ELISA Kit
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T
人卷曲蛋白8(FZD8)免疫試劑盒 human FZD8 ELISA Kit
ratadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouse17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISA試劑盒小鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素11(IL11)ELISA試劑盒 ,英文名: IL11 ELISA Kit
人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSecretinELISAKit 96T/48T
大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒 Rat connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
咖啡糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitHyl人羥賴氨酸規(guī)格:48T/96T
豬紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
One pit protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒
Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit 豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-GST(HumanAlpha-glathioneS-ansferases)ELISAKit人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶規(guī)格:48T/96T
血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Plagrowthhormone,GHELISAKit植物生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
MERTK和FLT3抑制劑(MRX-2843)SULT2A1 英文名稱: 膽鹽磺基轉(zhuǎn)移酶 0.1ml
FAM50A 英文名稱: FAM50A蛋白抗體 0.2ml
髓鞘堿性蛋白抗體 Anti-MBP 0.1ml
Anti-RNF126/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)指蛋白126抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PIK3R1(Tyr467) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
ADNP (NAP) (Activity-dependent Neuroprotective protein ) 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg