VEGFR2抑制劑（Brivanib alaninate）

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱英文名稱產(chǎn)品規(guī)格發(fā)貨周期
Brivanib alaninate1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg1～3天

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸埃希氏桿菌Saccharomyces sp.

釀酒酵母Saccharomyces sp.

冰凍膨脹芽孢桿菌Schizosaccharomyces sp.

紅淡紫灰鏈霉菌Schizosaccharomyces sp.

越南伯克霍爾德氏菌Candida sp.

腫基被孢霉Schizosaccharomyces sp.

溶血不動桿菌基因型4Schizosaccharomyces pombe

蘇云金芽胞桿菌科爾默亞種Schizosaccharomyces pombe

波羅的海西瓦氏菌Saccharomyces cerevisiae

泛菌屬Sporobolomyces salmonicolor

戊糖乳桿菌Saccharomyces cerevisiae

氧化微桿菌Saccharomyces cerevisiae

蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)Saccharomyces cerevisiae

羅倫隱球酵母羅倫變種Saccharomyces cerevisiae

假單胞菌屬Saccharomyces cerevisiae

禾頂囊殼小麥變種Saccharomyces exiguus

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒癌相關(guān)基因2抗體（鋅指蛋白364）人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)商陸皂苷辛

小鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒B淋巴酪激抗體人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)商陸皂苷乙

小鼠α1抗胰糜蛋白(AACT)免疫試劑盒腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF) 商陸皂苷元

小鼠α1干擾(IFN-α1)免疫試劑盒促凋亡BNIP3L蛋白抗體人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF) 尚含雞納甙
VEGFR2抑制劑（Brivanib alaninate）ZNF804A 英文名稱： 鋅指蛋白804A抗體 0.2ml

DBC2 英文名稱： 癌基因刪除蛋白2抗體 0.2ml

β淀粉樣肽(1-16)抗體 Anti-β-Amyloid 0.1ml

Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FADD(Ser191) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Cyclin B1 周期素B1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg