c-Raf抑制劑（ZM 336372）

c-Raf抑制劑（ZM 336372）公司正在出售的產(chǎn)品：TERT/FITC 熒光標(biāo)記端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體IgG
Tetracycline/FITC 熒光標(biāo)記四環(huán)抗體IgG
Tetraspan5/FITC 熒光標(biāo)記四分子交聯(lián)體5抗體IgG
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 熒光標(biāo)記NF-κB活化激抗體IgG
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體Ig

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
平菇—8804Pseudomonas stutzeri大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas stutzeri大鼠血紅氧合1(HO-1)

枯草芽孢桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠血紅氧合1(HO-1)

聚多曲霉Pseudomonas stutzeri大鼠磷脂A2(PL-A2)

黑曲霉Pseudomonas stutzeri大鼠磷脂A2(PL-A2)

香菇Pseudomonas stutzeri大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

大腸埃希菌Pseudomonas stutzeri大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

橘青霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白5(AQP-5)

波蘭青霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白5(AQP-5)

細(xì)孢毛霉Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白4(AQP-4)

枯草芽孢桿菌Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白4(AQP-4)

綠色木霉Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白3(AQP-3)

無(wú)Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白3(AQP-3)

葡萄座腔菌Pseudomonas stutzeri大鼠水通道蛋白1(AQP-1)

枯草芽孢桿菌Pseudomonas synxantha大鼠水通道蛋白1(AQP-1)

異常威克漢姆酵母Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白0(AQP-0)

腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體銀白離褶傘鎂(Mg)比色法測(cè)試盒

白細(xì)胞介1受體相關(guān)蛋白抗體長(zhǎng)根菇鋅(Zn)比色法測(cè)試盒

多配體聚糖4抗體洛巴伊口蘑(金福菇)鉀離子(K)比濁法測(cè)試盒

血小板源性生長(zhǎng)因子D脊髓源性生長(zhǎng)因子B桃紅側(cè)耳銅(Cu)比色法測(cè)試盒
c-Raf抑制劑（ZM 336372）尖孢鐮刀 硫酸軟骨

紅緣層孔 土荊皮乙酸

雪白根霉 色C

中華游動(dòng)微 穗花杉雙黃酮

大孔多孔 色C

芽枝狀枝孢 沙苑子苷A

短小芽孢桿 色C

腸膜明串珠 巴豆苷

阿姆斯特丹曲霉 植物血球凝集

球毛殼 黃杞苷

多色青霉 水晶蘭苷

嗜熱脂肪地芽孢桿 8-O-乙酰山梔苷甲酯

釀酒酵母 大車前苷

云芝 DL3000 DNA Marker

花生網(wǎng)斑病* 表告依春