商品介紹:
Kif15-IN-2是Kif15驅(qū)動蛋白抑制劑,抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:672926-33-9 純度:96.51% 分子量:440.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Kif15驅(qū)動蛋白抑制劑(Kif15-IN-2)
英文名稱:Kif15-IN-2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
麗鹽單胞菌人鈣網(wǎng)蛋白Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠催乳(PRL)
帚狀曲霉人網(wǎng)膜Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠抵抗(Resistin)
礦泉水 大腸菌群人基質(zhì)γ羧基谷蛋白Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠抵抗(Resistin)
絲球霉屬人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠乙酰受體抗體(AChRab)
局限青霉人螺旋肽Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠乙酰受體抗體(AChRab)
首爾紅色桿菌人溶體相關(guān)膜蛋白2Bacillus thuringiensis subsp. israelensis小鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
支氣管敗血波氏菌人軟骨糖蛋白39Bacillus thuringiensis subsp. galleriae小鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
節(jié)桿菌人不透光相關(guān)蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kenyae小鼠γ基丁(GABA)
大腸埃希菌人鞭毛蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kenyae小鼠γ基丁(GABA)
柱狀假絲酵母人多聚血清蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kenyae小鼠5羥色(5-HT)
米根霉人胞漿免疫球蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kenyae小鼠5羥色(5-HT)
大豆慢生根瘤菌人纖維介蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kenyae小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)
嗜嗜熱雙歧桿菌豬亞種人泛蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)
草螺菌人類粘蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠P物質(zhì)(SP)
釀酒酵母人彈性蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠P物質(zhì)(SP)
孟氏假單胞菌人套膜蛋白Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠血管活性腸肽(VIP)
離子通道蛋白27抗體桂花耳COC1細(xì)胞耐藥亞株
跨膜受體蛋白Notch-2抗體冷杉囊孔菌昆蟲卵巢細(xì)胞
生殖細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體小鱗毛銹傘貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞
親核β1抗體粉色小菇牛陀螺狀細(xì)胞
Kif15驅(qū)動蛋白抑制劑(Kif15-IN-2)溶血孿生球 桿肽
戴爾根霉 常春藤苷D
葉柄粘球 桿肽鋅
厭糖鹽土生古 常春藤苷C
焦曲霉 二氫歐山芹
杰丁畢赤酵母
灰黃青霉 蒼術(shù)苷A
假單胞 α-常春藤皂苷
嗜冷假單胞 紅霉
樟疫霉 環(huán)氧續(xù)隨子
稻黑孢(可提供)
類干酪乳桿類干酪亞種 桔皮
葉近藤氏酵母 塔薩敏
根瘤 三羥甲基氨烷
微小桿 大豆皂苷Bb