自噬抑制劑-1(Spautin-1)

自噬抑制劑-1(Spautin-1)公司*的產(chǎn)品：Beta2-GP1 Ab IgG(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgG二十二碳五烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACA-IgM(Human cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 人抗心脂抗體IgM反油 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACA-IgG(H

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：自噬抑制劑-1(Spautin-1)

英文名稱：Spautin-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

解脂亞羅酵母腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體Human MBP/MBL(Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)

植物乳桿菌神經(jīng)激肽A抗體Human IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit甲狀旁腺激1受體(PTH1R)

松衫暗孔菌磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human S100A1/S100(Protein S100-A1) ELISA Kit甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)

側(cè)孢短芽孢桿菌磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human FE(Ferritin) ELISA Kit甲狀旁腺激(PTH)

短芽孢桿菌核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human sTfR1(Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)

釀膿鏈球菌膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human FPA(Fibrinopeptide A) ELISA Kit甲酰甲硫(fMet)

茄鏈格孢谷受體2A抗體Human TF(Transferrin) ELISA Kit甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)

小煤炱菌屬磷化谷受體2B抗體Human AFP(alpha Fetoprotein) ELISA Kit甲基化(Methylase)

羊邊蟲（綿羊無漿體—永壽株）谷受體2B抗體Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)

下彎巴克斯霉磷化核仁磷蛋白抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) ELISA Kit喋呤(MTX)

黃綠木霉磷化核仁磷蛋白抗體Human PI(Proinsulin) ELISA Kit己糖激3(HK3)

黃海芽孢桿菌磷化核仁磷蛋白抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) ELISA Kit己糖激(HK)

雙孢蘑菇（可訂購）核因子κB抑制蛋白β抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) ELISA Kit幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)

絲狀支原體山羊亞種磷化谷受體2A抗體Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)

晶粒鬼傘間質(zhì)衍化因子受體1抗體Human PI(Proinsulin) ELISA Kit集落激因子(CSF)

青色鏈霉菌神經(jīng)分化因子2抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) ELISA Kit集蛋白亞家族成員11(COLEC11)

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000防己諾林堿

枯草芽胞桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:10000粉防己堿

楚氏喜鹽芽胞桿菌Halobacillus│trueperi 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:90000輔Q10
自噬抑制劑-1(Spautin-1)雅氏艾美耳球蟲 雙歧桿BS培養(yǎng)基（不含瓊脂）纖維二糖Elisa

彎曲芽胞桿 動力培養(yǎng)基纖維木糖Elisa

球孢白僵 鄰苯二甲酸二異癸酯糖皮質(zhì)Elisa

大腸埃希 TGY瓊脂甲狀旁腺Elisa

冬克青霉 RSMA培養(yǎng)基抗酸性磷酸Elisa

Sphingomonas oligoaromativorans 鄰單胞鑒別瓊脂Ⅰ型膠原C端肽Elisa

枯草芽孢桿 硫酸鹽還原專屬培養(yǎng)基（postgate培養(yǎng)基）I型前膠原氨基端肽Elisa

黑木耳 3,4'-二氨基二苯基副流感病Elisa

金針菇（F4-11） 凍干兔血漿脂肪酸合成Elisa

平菇 R3增殖培養(yǎng)基6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa

皺褶假絲酵母 沙保羅氏瓊脂硬脂酰去飽和Elisa

苜蓿莖點霉 疊氮磷酸二苯酯（DPPA）酮酸脫氫激4Elisa

秀珍菇 厭氧產(chǎn)氣包口蹄疫病非結(jié)構(gòu)蛋白3ABCElisa

米曲霉疏展變種 多粘B(4ug)骨化二Elisa

黃桿 硫酸新霉（100ug）骨化三Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)