Akt2抑制劑(CCT128930)

Akt2抑制劑(CCT128930)公司正在出售的產(chǎn)品：Icos/CD278/FITC 熒光標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同激分子CD278抗體IgG吡啶-4- 99%
ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC 熒光標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體IgG2-吡啶 98%
IDE/FITC 熒光標(biāo)記胰島降解抗體IgG鹽丁 99%
ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鏈霉菌大鼠抑制AAnti-RAD51D Antibody人乙呋(AD)

孟氏假單胞菌小鼠Anti-RAD51B Antibody人乙呋(AD)

綠粘帚霉人原激活肽Anti-RALGAPA2 Antibody人唾液(SA)

黑曲霉人α1性糖蛋白Anti-RAD52 Antibody人唾液(SA)

短波單胞菌小鼠β葡糖苷Anti-RAD54B Antibody人鞘磷脂(SM)

地衣芽孢桿菌大鼠絨毛膜促性腺激βAnti-RAD54L Antibody人鞘磷脂(SM)

土壤成對(duì)桿菌大鼠性激結(jié)合球蛋白Anti-RALY Antibody人尿游離皮質(zhì)(UFC)

枯草芽孢桿菌小鼠多巴Anti-RANBP17 Antibody人尿游離皮質(zhì)(UFC)

冷桿菌屬人內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)

葡萄座腔菌人二Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)

玉米大斑小鼠高靈敏度促甲狀腺激Anti-RANBP17 Antibody人硫皮膚(DS)

鮑魚(yú)側(cè)耳大鼠脫氫表雄S7Anti-RALY Antibody人硫皮膚(DS)

農(nóng)藥殘留速測(cè)儀（農(nóng)）大鼠脫氫表雄Anti-RAP2A Antibody人硫類(lèi)肝(HS)

香菇人胰淀Anti-RAP2C Antibody人硫類(lèi)肝(HS)

腐皮鐮孢小鼠高敏甲狀腺Anti-RAP1GAP Antibody人硫角質(zhì)(KS)

丁香暗黃鏈霉菌人血管活性腸肽Anti-RAP2B Antibody人硫角質(zhì)(KS)

微管蛋白β輔助因子D抗體冬蟲(chóng)夏草（斜面）CP70人卵巢癌細(xì)胞

結(jié)構(gòu)蛋白家族2抗體樺褐孔菌（斜面）人乳頭狀肺腺癌細(xì)胞

先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體茄病鐮刀菌（斜面）小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體小麥褐斑長(zhǎng)蠕孢霉（不提供）小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
Akt2抑制劑(CCT128930)根霉 D-谷氨酰

坎氏魏斯氏 D-天冬酰一水物

短小克銀漢霉 L-氨酰鹽酸鹽

釀酒酵母 β-乙酯鹽酸鹽

尖鐮孢 D-異亮

礦砂脂環(huán)酸芽孢桿 CBZ-L-纈

短小芽孢桿 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

適鹽屬 芴甲氧羰酰琥珀酰亞

洋蔥伯克霍爾德氏 N-乙酰-D-脯

大腸埃希氏 N-乙酰-L-脯

冷桿 N-乙酰-D-亮

釀酒酵母 N-乙酰-D-色

 N-乙酰-L-

海床游動(dòng)微 N-乙酰-L-色

燕麥生凹臍蠕孢 L-酪叔丁酯