商品介紹:
這個產(chǎn)品是ARRY-380的類似物,ARRY-380是高活性HER2抑制劑,IC50為8nM,對剪切型p95-HER2有相同的抑制性,比對EGFR的抑制性高500倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:937265-83-3 純度:96.42% 分子量:569.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希菌Pseudomonas umsongensis大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
蜂房哈夫尼菌Pseudomonas viridiflava大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)
松針散斑殼Pseudomonas viridiflava大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)
釀酒酵母Pseudomonas viridiflava大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)
粟粒皮禿馬勃Pseudomonas viridiflava大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)
墳?zāi)构?jié)桿菌Pseudomonas viridiflava大鼠碳酐(CA)
茶藨子葡萄座腔菌Pseudomonas viridiflava大鼠碳酐(CA)
熱帶假絲酵母Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)
凍土毛霉凍土變型Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)
寡養(yǎng)單胞菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠胃動(MTL)
天格爾黃桿菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠胃動(MTL)
*灰葡萄孢Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)
新疆鹽地桿菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)
黑曲霉Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠生長抑(SS)
迂回殼囊孢Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠生長抑(SS)
Pectobacterium cypripedii Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠血纖蛋白原(Fbg)
磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體雙孢蘑菇(褐蘑菇、棕色蘑菇)硫代反應(yīng)物(TBARS)比色法測試盒
突觸結(jié)合蛋白4抗體白黃側(cè)耳硫代反應(yīng)物(TBARS)熒光法測試盒
睪丸特異表達(dá)新基因5抗體草菇植物二醛(MDA)比色法測試盒
磷化糖皮質(zhì)激調(diào)節(jié)激1抗體熱帶靈芝二醛(MDA)比色法測試盒(TBA法)
HER2抑制劑(ARRY-380 analog)速生桿 SDS-PAGE蛋白質(zhì)次高分子標(biāo)準(zhǔn)
淡紫擬青霉 銀杏內(nèi)酯J
粘蓋牛肝 19-119kDa預(yù)先染色分子量MARK
解淀粉芽孢桿 14·4-116kDa分子量MARK
氣腫疽梭 灰氈毛忍冬皂苷乙
釀酒酵母 SDS-PAGE蛋白質(zhì)低分子量標(biāo)準(zhǔn)
紡織品 撕破強(qiáng)力(經(jīng)向、緯向) SDS-PAGE蛋白質(zhì)低分子量標(biāo)準(zhǔn)
湖北擬酵母 人參皂苷Ro
潘諾尼亞鎖霉 小分子量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)
球毛殼 楊梅苷
稀產(chǎn)鏈霉 4·1-66kDa低范圍分子量MARK
尖孢* SDS-PAGE蛋白質(zhì)超低分子量多肽
硫磺 透明質(zhì)酸鈉
堅絲單頂孢 牛胰島
紅細(xì)屬 γ-球蛋白(牛)