GABAAα5受體苯二氮激動(dòng)劑(MRK-016)

GABAAα5受體苯二氮激動(dòng)劑(MRK-016)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-OTR/FITC 熒光素標(biāo)記縮宮素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse Anti-goat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
促進(jìn)凋亡基因抗體 Anti-CIDE-B 0.2ml
Mouse A

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

變位艾耳球蟲Candida maltosa

游海假交替單胞菌Candida maltosa

灰酒紅鏈霉菌Candida maltosa

Bacillus aryabhattai Shivaji et al.    Candida maltosa

更新世肉桿菌Candida maltosa

聚生殼菌Candida melinii

枯草芽孢桿菌Candida membranifaciens

交鏈孢屬Candida membranifaciens

黑曲霉Candida melinii

枯草芽孢桿菌Candida nitrativorans

大腸埃希菌Candida oleophila

大腸埃希菌Candida oleophila

寡發(fā)酵鏈球菌Candida oleophila

豬丹絲菌Candida oleophila

平滑假絲酵母Candida oleophila

枯草芽孢桿菌Candida oleophila

小鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體人胃抑(GIP) 遼東楤木皂苷X

小鼠亮腦啡肽(Leu-ENK)免疫試劑盒腺病5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)人胃抑(GIP) 鄰二甲

小鼠鏈球菌(SK)抗體(IgG)免疫試劑盒載脂蛋白A1抗體人胃泌釋放多肽(GRP) 鄰甲氧基肉桂

小鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒自噬相關(guān)蛋白16A抗體人胃泌釋放多肽(GRP) 鄰香豆
GABAAα5受體苯二氮激動(dòng)劑(MRK-016)5 lipoxygenase 英文名稱： 5-脂氧合酶抗體 0.1ml

phospho-ECT2 (Ser370) 英文名稱： 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 0.1ml

反應(yīng)性溶血膜抑制蛋白抗體 Anti-CD59/potectin 0.1ml

Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GFAP (Ser8) 磷酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg