HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）

HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）公司正在出售的產(chǎn)品：RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠視黃結(jié)合蛋白4三氧化二鈷 AR,99.0%
6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺F1a銅 一水合物 99.95% metals bas

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

三葉草根瘤菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SECTM1 Antibody互生蛋白γ2(SNTγ2)

網(wǎng)脈木耳PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-SELENBP1 Antibody互生蛋白γ1(SNTγ1)

釀酒酵母膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SELL Antibody互生蛋白β2(SNTβ2)

細(xì)鏈格孢膠體金標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SELL Antibody互生蛋白β1(SNTβ1)

出芽短梗霉(黑酵母）羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SELP Antibody互生蛋白α1(SNTα1)

生芽紅細(xì)菌羅丹明標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SELP Antibody互聯(lián)蛋白神經(jīng)元中間絲蛋白α(INα)

梨生囊殼孢FITC標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SELL Antibody(PB0399)琥珀受體1(SUCNR1)

蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SELP Antibody(PB0288)骺蛋白聚糖(EPYC)

乳桿菌屬辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SELPLG Antibody紅藻離子能谷受體2(GRIK2)

豬鏈球菌（不可提供）辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-SELPLG Antibody紅衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)

乙型副傷寒沙門菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3A Antibody紅膜蛋白7.2b(STOM)

鏈球菌(不定種)PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3A Antibody紅補(bǔ)體受體1(CR1)

清酒假絲酵母PE-Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3B Antibody亨廷頓關(guān)聯(lián)蛋白1(HAP1)

釀酒酵母PE-Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGAnti-SEMA3C Antibody亨廷頓蛋白(HTT)

變灰青霉PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-Sema6A Antibody黑轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)

泊庫(kù)島食烷菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-SENP6 Antibody黑曲菌(MREG)

軸突生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子3抗體總狀毛霉（斜面）大鼠肺泡上皮細(xì)胞提取物

B淋巴細(xì)胞鏈接激活蛋白抗體河流弧菌大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物

腦啡肽2抗體Lysinibacillusmacroides大鼠滑膜細(xì)胞提取物

神經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體Massiliahaematophila大鼠骨骼肌細(xì)胞提取物
HDAC6抑制劑（Tubastatin A鹽酸鹽）杰氏假單胞 聚乙二2000單甲

擬枝孢鐮孢 筋骨草L2

Marisediminicola 筋骨草G1

炭黑曲霉 聚乙二1900單甲

根瘤 筋骨草H1

莫哈韋芽孢桿 聚乙二750單甲

金針12 筋骨草F4

細(xì)枝農(nóng)霉 地芰普內(nèi)酯

呼倫貝爾無(wú)色需堿 聚乙二550單甲

異常漢遜酵母 山橘脂酸

釀酒酵母 3-表去氫土莫酸

嗜鹽芽孢桿 中性氧化鋁

米曲霉 中性氧化鋁

大腸桿 6α-羥基豬苓酸C

漢塔成對(duì)桿 堿性氧化鋁