PLK1激酶抑制劑（SBE13 Hydrochloride）

PLK1激酶抑制劑（SBE13 Hydrochloride）公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-FAK (Tyr861) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激抗體IgG
Phospho-FAK (Tyr576/577) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激抗體IgG
Phospho-FAK (Tyr925) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激抗體IgG
Pho

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

紅曲紅曲人α乳清蛋白Escherichia coli小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)

干巴革菌人N-乙?；?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯Escherichia coli小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)

蠅卷霉人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Escherichia coli小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)

產(chǎn)短桿菌人腦紅蛋白Escherichia coli小鼠脂聯(lián)(ADP)

類阿達(dá)青霉人的牛血清白蛋白殘留檢測Escherichia coli小鼠脂聯(lián)(ADP)

根瘤菌人β淀粉樣蛋白1-40Escherichia coli小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)

枯草芽孢桿菌人髓磷脂堿性蛋白Escherichia coli小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)

釀酒酵母人高遷移率族蛋白B1Escherichia coli小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)

蒼白鹽八疊球菌人結(jié)蛋白Escherichia coli小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)

疏毛盤多毛孢人S100蛋白Escherichia coli小鼠白介8(IL-8/CXCL8)

蠟樣芽孢桿菌人S100B蛋白Escherichia coli小鼠白介8(IL-8/CXCL8)

根瘤菌人巨噬炎性蛋白2Escherichia coli小鼠周期D3(Cyclin-D3)

球擬圓酵母人凝膠原蛋白Escherichia coli小鼠周期D3(Cyclin-D3)

鼎湖鱗傘（只能確定到屬）人踝蛋白Escherichia coli小鼠周期D2(Cyclin-D2)

謝瓦曲霉人角化內(nèi)分泌因子Escherichia coli小鼠周期D2(Cyclin-D2)

鴨瘟病抗血清人氧化低密度脂蛋白Escherichia coli小鼠雌激(E)

NADPH氧化2抗體褐環(huán)粘蓋牛肝菌人氣道上皮細(xì)胞

9號染色體開放閱讀框156抗體東方栓菌倉鼠卵巢細(xì)胞(二氫葉還原缺陷)

細(xì)胞粘附分子3抗體脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白3淡色叢赤殼小鼠胰島β細(xì)胞

核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體真姬離褶傘人中性粒細(xì)胞
PLK1激酶抑制劑（SBE13 Hydrochloride）大腸埃希 羅漢果苷III

分枝節(jié)桿 3-(N-啉)磺酸

硫磺色節(jié)桿 2-(N-啉)乙磺酸

黃色籃狀 山楂酸

長雙歧桿 2-(環(huán)己)乙磺酸

草木棲劍 棕矢車菊

Lysinibacillus xylanilyticus 3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-2-羥基-1-磺酸

 異芒果苷

慢生根瘤 3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-1-磺酸

基生梭孢殼 伊立替康

蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 N-三（羥甲基）甲基甘

彎孢 N,N-雙（2-）甘

綠色木霉 羥基酪

黃曲霉 N,N-雙（2-）-2-氨基乙磺酸鈉鹽

節(jié)狀鐮孢 七葉皂苷D