PDGFR/FGFR和Src家族抑制劑(PP58)

PDGFR/FGFR和Src家族抑制劑(PP58)公司*的產(chǎn)品：Anti-SLC4A4/FITC 熒光素標(biāo)記碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
一氧化氮合成酶-3抗體 Anti-NOS-3/eNOS 0.1m

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PDGFR/FGFR和Src家族抑制劑(PP58)

英文名稱：PP58

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis豬內(nèi)皮1(ET-1)

白地霉Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白M(IgM)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白M(IgM)

慢生根瘤菌Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白G(IgG)

北方蜜環(huán)菌Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白G(IgG)

果生鏈核盤菌Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白E(IgE)

淤泥麗鹽菌Bacillus thuringiensis豬免疫球蛋白E(IgE)

擬可可毛球二孢Bacillus thuringiensis豬可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

亞金黃粘蓋牛肝菌Bacillus thuringiensis豬可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

鏈格孢菌Bacillus thuringiensis豬巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)

根瘤菌Bacillus thuringiensis豬巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)

蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種Bacillus thuringiensis豬角化生長因子(KGF)

大腸埃希氏菌*Bacillus thuringiensis豬角化生長因子(KGF)

細(xì)黃鏈霉菌Bacillus thuringiensis豬基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

塊菌Bacillus thuringiensis豬基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

米曲霉疏展變種Bacillus thuringiensis豬基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)

肺表面活性蛋白C抗體頸玫瑰單胞菌可法里斯沙門菌

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DEC2抗體丁香假單胞菌茶致病變種姆班達(dá)沙門菌

細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體壁芽孢桿菌史華沙門菌

細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體佐氏紅球菌塞羅沙門菌
PDGFR/FGFR和Src家族抑制劑(PP58)ZBTB6 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB6抗體 0.2ml

DACT3 英文名稱： Dapper3蛋白抗體 0.2ml

膜粘連蛋白 Ⅲ抗體 Anti-Annexin Ⅲ 0.1ml

Anti-ZO-1/FITC 熒光素標(biāo)記胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK5( Ser731+Thr733) 磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體 規(guī)格 0.1ml

DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)