Topo II抑制劑（Voreloxin Hydrochloride）

Topo II抑制劑（Voreloxin Hydrochloride）公司正在出售的產(chǎn)品：Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 熒光標記視黃受體應(yīng)答蛋白3抗體IgG
rInsulin /HRP 辣根過氧化物標記抗重組人胰島抗體IgG
rInsulin /FITC 熒光標記抗重組人胰島抗體IgG
rInsulin human monoclonal/FITC 熒光標記小鼠重組人

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

魚肉  總孔雀石綠、結(jié)晶紫Pseudomonas corrugata大鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)

小孔菌屬Staphylococcus warneri大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)

氧化黃色桿菌Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)

蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas corrugata大鼠生長激釋放多肽(GHRP)

繩狀籃狀菌Lactobacillus rhamnosus大鼠生長激釋放多肽(GHRP)

巨孢毛霉Lactobacillus fermentum大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)

檸檬綠木霉Enterococcus faecalis大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)

尖孢鐮孢Leuconostoc lactis大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)

果生鏈核盤菌Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)

尖鐮孢Enterococcus faecium大鼠血栓前體蛋白(TpP)

大腸埃希氏桿菌Enterococcus cecorum大鼠血栓前體蛋白(TpP)

鏈格孢Enterococcus hirae大鼠抑制B(INH-B)

靈芝Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum大鼠抑制B(INH-B)

釀酒酵母Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠胰島受體β(ISR-β)

枯草芽孢桿菌Halorubrum saccharovorum大鼠胰島受體β(ISR-β)

意大青霉Haloferax mediterranei大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)

突觸抗體/突觸相關(guān)蛋白-1肺形側(cè)耳(秀珍菇)低密度脂蛋白膽固(LDL-C)比色法測試盒(雙試劑直接法)

分泌抗體離褶傘植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性

子宮內(nèi)膜抗體白鬼傘植物類黃比色法測試盒

碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4抗體叢生地星植物總比色法測試盒
Topo II抑制劑（Voreloxin Hydrochloride）雞傷寒沙門氏 異阿魏酸

黃絮鱗鵝膏 馬脾鐵蛋白

pGEX-2T 內(nèi)酯酮

扣囊復(fù)膜孢酵母 玉米蛋白

氣傳原小單孢 人血纖維蛋白原

枯草芽孢桿 石斛堿

淡紫擬青霉 牛血紅蛋白

球毛殼 10-姜

韓國苯基桿 鏈親和

韓國游動微 8-姜

尖孢鐮刀萎黃瓜?；?/span> 卵白（雞蛋）

谷棒桿 人血清白蛋白(組份五)

缺陷短波單胞 7-羥基

紅根須腹 雞蛋清白蛋白

孢籃狀 松蘿酸