以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
多靶點抑制劑(Amuvatinib) | Amuvatinib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Amuvatinib(MP-470)是多靶點抑制劑,對c-Kit(D816H),PDGFRα(V561D)和FLT3(D835Y)的IC50分別為10nM,40nM和81nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:850879-09-3 別名:MP470;HPK 56 純度:99.84% 分子量:447.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
白僵菌凋亡原位(我公司提供代測服務(wù))Escherichia coli小鼠癌標(biāo)志物-CA153
溜曲霉Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199
谷棒桿菌Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199
尖孢鐮刀菌Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)
蚜蟲枝孢Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)
豇豆慢生根瘤菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)
大腸埃希氏菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)
白色類諾氏菌(可定)Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)
涎沫假絲酵母Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)
殼青霉Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)
臘梅擬莖點霉廣譜SP免疫組化(用于檢測兔、大鼠、小鼠和豚鼠來源的一抗)Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)
矩圓黑盤孢SP免疫組化(兔)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)
雅致放射毛霉SP免疫組化(小鼠)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)
塔賓曲霉T淋巴亞群檢測盒(SAP法)Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)
Sphingobacteriaceae封閉用正常山羊血清(原液)Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)
解酯假絲酵母解酯變種封閉用正常兔血清(原液)Escherichia coli小鼠水通道蛋白1(AQP-1)
鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體血痕韌革菌小鼠綠色熒光標(biāo)記的肺癌細(xì)胞
軸突生長誘向因子4抗體粘滑菇屬HSF(DMEM(高糖)+15%FBS 澳洲胎牛)
核基質(zhì)蛋白22復(fù)瓣黑刺革菌小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克(小鼠成纖維細(xì)胞)
神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化2抗體漏斗狀側(cè)耳人晶體上皮細(xì)胞永生系
多靶點抑制劑(Amuvatinib)終腐霉 哌-N,N-雙(2-羥基乙磺酸)
彩色豆馬勃 蝙蝠葛蘇林堿
頂孢頭孢霉 哌-N,N-雙(2-乙磺酸鈉)
哌-N,N-雙(2-乙磺酸)
厚垣孢普可尼亞 玉米黃
鴨疫里氏桿 N-(2-)哌-N'-4-丁磺酸
丁香假單胞 柯里京
費氏中華根瘤 N-(2-)哌-N-乙磺酸鈉鹽
大豆慢生根瘤 千金藤
小單孢 N-(2-)哌-N-(2-乙磺酸)
球孢白僵 兒茶沒食子酸
釀酒酵母 N-(2-)哌-N-2-羥基磺酸鈉鹽
尖孢(可訂購) N-(2-)哌-N-2-羥基磺酸
擬莖點霉 單咖啡酰
膠孢 N-(2-)哌-N-3-磺酸